Antitumorale Wirkungsmechanismen eines bispezifischen Antikörpers in vitro gegenüber Einzelzellen und dreidimensionalen Sphäroiden

摘要

Da die Prognose für Patienten mit Kopf-Hals-Karzinomen trotz Verbesserung derchirurgischen und strahlen- bzw. chemotherapeutischen Strategien unverändertschlecht ist, werden vermehrt immunologische Therapieansätze erforscht, die einesystemisch wirksame und gleichzeitig tumorspezifische Behandlung ermöglichensollen. Dadurch soll die Häufigkeit von Lokalrezidiven und Metastasen gesenktwerden.Bispezifische Antikörper werden in diesem Zusammenhang als vielversprechendeTherapieoption angesehen. Sie erkennen einerseits Tumorzellen und redirigierenandererseits Immunzellen an den Ort des Tumors. So soll eine immunologischeAuseinandersetzung mit dem Tumor angestoßen werden. Komplette bispezifischeAntikörper können darüber hinaus akzessorische Zellen binden. Diese Zellenbesitzen die Fähigkeit zur Phagozytose und Präsentation phagozytierter Proteine.Hiervon verspricht man sich die Induktion eines langfristigen humoralenGedächtnisses gegen den Tumor.In der vorliegenden Arbeit wurde der komplette bispezifische Antikörper BiUII(aEpCAM/aCD3) untersucht. Es wurde postuliert, dass dieses Molekül in der Lagesei, sogenannte Tri-Zell-Komplexe aus Tumorzellen, T-Zellen und akzessorischenZellen zu vermitteln. Die Eingangsexperimente sollten daher die grundlegende Frageklären, welche Zellkontakte durch BiUII herbeigeführt werden können, und ob in vitroTri-Zell-Komplexe darstellbar sind. Anschließend wurde die antitumorale Wirksamkeitdes Antikörpers an Einzelzellen und an dreidimensionalen Tumorzell-Sphäroidengetestet.Mit immunzytochemischen Färbungen an Einzelzell-Präparaten konnte erstmals dieBildung von Tri-Zell-Komplexen nachgewiesen werden. Die durch BiUII angestoßeneImmunreaktion führte innerhalb von wenigen Stunden zu einer effizienten Tumorzellelimination.Neben unspezifischen Mechanismen konnte die Phagozytose vonTumorzellen als ein Weg der BiUII-vermittelten Tumorzellzerstörung beobachtetwerden.Wir konnten darüber hinaus zeigen, dass BiUII auch in Tumorzell-Sphäroiden, einemdreidimensionalen Modell für Mikrometastasen, zu einer vollständigen Elimination vitaler Tumorzellen führte, ohne dass hierfür die exogene Zufuhr immunstimulatorischerSubstanzen erforderlich war.Die beschriebenen in vitro-Ergebnisse zeigen also zum einen, dass der bispezifischeAntikörper BiUII diejenigen Anforderungen erfüllt, die aufgrund seiner Konstruktiongefordert wurden und zum anderen, dass das Molekül in vitro ein sehr hohesantitumorales Potential aufweist.Weiterführende Experimente werden unternommen, die die Mechanismen derTumorzellzerstörung detaillierter beschreiben sollen. Darüber hinaus ist es Ziel derkommenden Untersuchungen, mögliche Komedikationen sowie andere Applikationsformen(z.B. intratumoral) zu testen, um die bei systemischer Gabe beobachtetenNebenwirkungen einzuschränken.