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Análise de fluxos metabólicos com substrato isotopicamente marcado (13C-MFA) em S. typhimurium

机译:鼠伤寒沙门氏菌中同位素标记底物(13C-MFA)的代谢流分析

摘要

Linhagens atenuadas de Salmonella têm sido estudadas para produção e veiculação de substâncias com fins terapêuticos. Modelos metabólicos à escala genômica são ferramentas importantes no desenvolvimento de estratégias de engenharia metabólica. Este trabalho teve por objetivo obter dados experimentais para aprimorar o modelo metabólico e aprofundar o conhecimento do metabolismo de S. typhimurium (St). Foram realizados cultivos contínuos à taxa de diluição (D) de 0,24 e 0,48 h-1, utilizando U-13C-glicose como substrato. Aminoácidos da biomassa foram analisados por GC-MS. A análise de fluxos metabólicos permitiu determinar a distribuição de fluxos nas principais vias metabólicas de St. A glicólise foi a via majoritamente utilizada para catabolisar a glicose. As maiores diferenças nos fluxos estimados, para as duas D, verificaram-se nas vias anapleróticas. Sobrepondo os dados de fluxos intracelulares ao modelo metabólico será gerado um modelo mais preciso do metabolismo de S. typhimurium.
机译:已经研究了沙门氏菌减毒株系用于生产和输送用于治疗目的的物质。基因组规模的代谢模型是代谢工程策略发展中的重要工具。这项工作旨在获得实验数据,以改善代谢模型并加深鼠伤寒沙门氏菌(St)的代谢知识。使用U-13C-葡萄糖作为底物,以0.24和0.48 h-1的稀释率(D)进行连续培养。通过GC-MS分析来自生物质的氨基酸。代谢流量的分析可以确定圣糖酵解主要代谢途径中流量的分布,这是最常用于分解葡萄糖的途径。对于两个D,估计流量的最大差异是在动脉通路中发现的。在代谢模型上叠加细胞内血流数据将生成鼠伤寒沙门氏菌代谢的更准确模型。

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