Új elválasztástechnikai módszerek kidolgozása nem enzimatikus glikáció vizsgálatára. Diabétesz következtében kialakuló nefropátiák vizsgálata vérben és vizeletben előforduló fehérjék glikáltságának analízisével. = Development of new separation methods for the nonenzymatic glycation. Investigation of the nonenzymatic glycation of proteins isolated from blood and urine in case of renal nephropathy caused by diabetes II.

摘要

• Új mintaelőkészítési eljárást dolgoztunk ki nem-enzimatikusan glikálódott fehérjék triptikus emésztményének különböző szilikagél alapú állófázisokon (C18, C30, C60(10)-, C60(30)- , C60(100)-fullerénszilika) történő frakcionálására és dúsítására. • Elsőként térképeztük fel a fibrinogén lehetséges glikációs helyeit. • Optimalizáltuk a glikált fehérje emésztmények szelektív dúsítására alkalmas boronát-affinitáskromatográfiás körülményeket. • Meghatároztuk a diabetes mellitus-ban szenvedő betegek vérszérumából nyert HSA (Human Serum Albumin) glikáltsági szintjét. • Különbséget véltünk felfedezni a beteg és kontrol csoport szérum és vizelet HSA glikáltsági szintje között. A várakozásoknak megfelelően több lehetséges glikációs hely módosult a diabetes mellitus-ban szenvedő betegek esetében. • A HSA 414K és a 428R glikációs helyei biomarker jelentőségűek lehetnek. • Különbséget mutattunk ki MALDI-TOF technikával Shigella zonei mutáns törzsek endotoxiunjainak (LPS) struktúráiban a teljes core és Lipid A szerkezetek megadásával. • Potenciális biomarkereket sikerült folyadékkromatografiás és tömegspektrometriás módszerekkel Crohn beteg vizeletéből azonosítani a II. számú Belgyógyászati Klinika együttműködésével. Ezen a fehérje biomarkerek mennyisége a betegség különböző stádiumaiban eltérő. | • New sample preparation method was developed for the fractionation on silica based materials (C18, C30, C60(10)-, C60(30)-, C60(100)-fullerene silica) and selective enrichment of the in vitro glycated tryptic peptides. • Possible glycated sites of the fibrinogen were described first. • The crucial circumstances of the boronate affinity chromatography were optimized for the selective enrichment of the glycated tryptic peptide. • The glycation level of the HSA (Human Serum Albumin) collected from patients suffering from type 2 diabetes was determined. • A difference was discovered between the glycation level of the serum and urine of the patients suffering from diabetes mellitus and the healthy volunteers. • 414K and 428R, glycation sites of the HSA might serve as a biomarker of diabetes mellitus • Distinction was established in the structure of mutant Shigella zonei exotoxins (LPS) by the whole structure of the core and Lipid A with MALDI-TOF mass spectrometer. • A potential biomarkers were determined from urine of a patient suffering from Crohn disease with liquid chromatograpy and mass spectrometric methods collaborating with the 2nd Department of Internal Medicine and Nephrology Centre. The amount of these proteins varies in different statuses of the disease.