Célzott terápiára alkalmas új peptidkonjugátumok szintézise és alkalmazása rosszindulatú daganatok kezelésében. = Development of new peptide conjugates for targeted therapy of cancer.

摘要

Célunk az volt, hogy olyan hatóanyag szállító rendszereket állítsunk elő, amelyek a tumornövekedést gátló hatóanyagokat szelektíven juttatják a tumoros sejtekbe. Ennek érdekében előállítottunk több mint 70 vegyületet, ezen belül kb. 50 GnRH illetve oligotuftsin hordozó – hatóanyag konjugátumot. Vizsgáltuk a konjugátumok in vitro tumorellenes hatását, sejtbe jutásukat, enzim stabilitásukat, metabolizmusukat és a metabolitok DNS kötődését. Összehasonlítottuk néhány vegyület receptorkötődési képességét. Szerkezet-hatás összefüggések vizsgálatával megállapítottuk, hogy milyen szekvencia módosítások, peptid-hatóanyag közötti kötéstípusok (pl. oxim, észter, hidrazon,) eredményeznek hatékonyabb konjugátumokat. A tumorellenes hatást több hatóanyag sejtbe juttatásával is fokozni kívántuk. Ezért a konjugátumok dimerjeit, illetve több drog molekulát tartalmazó konjugátumot is előállítottunk. Vizsgáltuk a vegyületek kemotaxisát és sejtadhézióra gyakorolt hatását, amelyek fontosak a tumor metasztázisában. Az vizsgálatok megkönnyítése érdekében saját fejlesztésű kemotaxis chippet készítettünk. A tumorsejtekben kezelés hatására lejátszódó, fehérje és RNS szintű változások tanulmányozására proteomikai és RT-PCR módszereket alkalmaztunk. A kutatás adott fázisában az aktuálisan leghatékonyabb vegyületek in vivo tumorellenes hatását vizsgáltuk vastagbél tumorral beoltott egereken. Az eredményekből olyan következtetéseket vontunk le, amelyek jelentősek a további kísérletek szempontjából. | The aim of our project was the development of drug delivery systems that target anticancer drugs selectively to the tumor cells. For this purpose more than 70 new compounds, among them ca. 50 GnRH and oligotuftsin based carrier – drug conjugates, were prepared. In vitro antitumor activity, cellular uptake, enzyme stability and metabolism of the conjugates were studied. The DNA binding of the metabolites was also investigated. The receptor binding activity of several compounds was checked and compared. The structure – activity relationship studies showed the allowed substitutions in the peptide sequences. The influence of types of bond (e.g. oxime, ester, hydrazone) between the drug and carrier molecule on efficient drug release was identified. The antitumor activity of the compounds could be increased by the elevation of drug molecules (identical or different) on carrier molecules or by dimerization of the drug containing monomer conjugates. For the development of metastasis preventing compounds the chemotactic activity of the conjugates and their influence on cell adhesion were also studied. For these studies new chemotactic chips were developed. The protein or RNA based changes in the treated cells compared to untreated cells were studied by proteome analysis or by RT-PCR. The best compounds were selected for in vivo studies. The antitumor activity of the compounds was measured on colon cancer bearing mice. The results of the project are useful for the further research.