Sejt- és molekuláris biológiai tulajdonságok vizsgálata gyermekkori akut lymphoblastos leukaemiában. A minimális reziduális betegség nyomonkövetése, új kezelés stratégia kialakítása = Cellular and molecular biological properties of childhood acute lymphoblastic leukemia. Assessment of minimal residual disease and development of novel therepautic strategies

摘要

A gyermekkor leggyakoribb neoplasztikus elváltozásai a rosszindulatú vérképzőszervi betegségek. Fő célunk a gyermekkori akut lymphoblastos leukaemia (ALL), az akut myeliod leukaemia (AML), valamint a myelodysplasiás szindróma (MDS) kezelési eredményeinek és a tartós életminőség javítása volt új sejt- és molekuláris biológiai diagnosztikai és terápiás eljárások bevezetésével. Elemeztük a kombinált citosztatikus ALL-BFM-95 protokollal elért kezelési eredményeket gyermekkori ALL-ben. Tanulmányoztunk új leukaemia-asszociált marker (FXIII-A) kifejeződését AML és ALL blasztokban és négyszínű immunfluoreszcens jelölés alkalmazási lehetőségeit. Ezen módszerek alkalmasak a leukaemiás sejtpopuláció megbízható azonosítására és a minimális maradék betegség (MRD) meghatározására, ezért szerepet játszhatnak a rizikóbecslésben. Elemeztük serkentő és gátló hatású citokinek szabályozó hatásait gyermekkori ALL-ben, MDS-ben, essentiális thrombocythemiában és összehasonlításként lobos folyamatokban. Vizsgáltuk a hagyományos citosztatikus kezelés kiegészítésére lehetőséget teremtő innovatív terápiás eljárásokat, rituximab, interferon-alfa, cisz-retinsav és bcl-2 antisense oligonukleotid preparatum in vitro és in vivo terápiás effektusait. A sejtterápiás eljárások fejlesztése céljából modellként tanulmányoztuk Glanzmann thrombasthaeniás beteg rendellenességét komplex molekuláris módszerekkel, valamint a kóros és a vad típusú gének transzfektálásának hatékonyságát emlős sejtekben. | Hematopietic malignancies represent the most frequent form of cancer in children. The major aim of the present project was to improve treatment results and quality of life in children with acute lymphoblastic leukemia (ALL), acute myeloid leukemia (AML) and myelodysplastic syndromes (MDS) by introducing novel cellular and molecular biological diagnostic and therapeutic methods. Nationwide results in children with ALL treated with the conventional combined cytostatic ALL-BFM-95 protocol were analyzed retrospectively. Expression of a novel leukemia-associated marker (FXIII-A) was studied in AML és ALL blasts and four color flow cytometric immunophenotyping was introduced. These methods allow the exact identification of the leukemic cell population rendering them powerful tools for assessing minimal residual disease and risk estimation. Regulatory effects of stimulatory and inhibitory cytokines were analyzed in childhood ALL, MDS and essential thrombocythemia as compared to inflammatory lesions. Innovative adjuvant treatment approaches, such as in vitro and in vivo therapeutic effects of rituximab, interferon-alpha, cis-retinoic acid and bcl-2 antisense oligonuleotide preparation were studied. As a molecular model for developing cell therapeutical methods, aberration of a patient with Glanzmann thrombasthenia was assessed by applying complex molecular methods and transfecting the mutant and wild-type genes into mammalian cells.