Efecto 'in vitro' de interferón de tipo I sobre la expresión de retrovirus felinos y evaluación de su aplicación terapéutica en gatos con infección natural

摘要

La leucemia y la inmunodeficiencia felinas son dos enfermedades muy importantes en la clínica de pequeños animales aunque las campañas de vacunación y control que se están llevando a cabo hayan reducido significativamente su prevalencia e incidencia. A día de hoy, no existe un tratamiento curativo para ninguna de las dos infecciones, lo que está obligando a los veterinarios a utilizar, en muchas ocasiones de forma empírica, antivíricos y/o inmunomoduladores para controlar el progreso de la infección, alentados por los resultados positivos obtenidos con el virus de la inmunodeficiencia humana. Entre estos inmunomoduladores se encuentra un interferón recombinante humano (rHuIFN-α), registrado para medicina humana y utilizado en pacientes infectados por el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV+). Este IFN-α humano ofrece la ventaja de su fácil aplicación (vía oral) y su bajo coste, lo que hace que sea una alternativa muy interesante para el tratamiento de ambas retrovirosis. Por estos motivos se propuso como objetivo general de esta Tesis Doctoral estudiar el efecto del IFN-α en gatos con infección natural por el virus de la leucemia felina (FeLV) y el virus de la inmunodeficiencia felina (FIV) analizando distintos parámetros: cuadro clínico, alteraciones biopatológicas y evolución vírica. Este objetivo se desarrolló en tres subobjetivos: 1. Análisis del efecto in vitro sobre la expresión vírica, la actividad retrotranscriptasa RT, la viabilidad celular, la apoptosis y el ARN vírico del IFN-α 2a recombinante humano, el IFN-α (A/D) recombinante humano, y el IFN-ω recombinante felino en cultivos celulares linfoides infectados por FeLV y FIV. 2. Estudio de la situación inicial clínica, analítica y de la infección vírica de una población de gatos con infección natural por FeLV o FIV, para determinar las alteraciones y correlaciones significativas en ambas infecciones, y poder tenerlas como referencia para desarrollar el subobjetivo 3. 3. Evaluación de la evolución de la situación clínica, analítica y de la infección vírica en la población de gatos objeto de estudio tras aplicar el tratamiento por vía oral con IFN-α 2a recombinante humano (Roferon®). En los estudios in vitro tras la administración de interferón se observó que, aunque ninguno de los tres tipos empleados afectó a la síntesis de proteínas víricas (evaluadas a través de la expresión de la p27 de FeLV y de la p24 de FIV), sí se produjo una disminución estadísticamente significativa del número de partículas víricas infectivas (evaluadas a través de la presencia de transcriptasa inversa, RT) dependiente del tiempo de exposición y de la concentración de IFN. Esto indujo a pensar que el IFN reducía la formación de partículas víricas en células infectadas por FeLV o FIV en un punto de la replicación vírica post traducción: en la maduración, ensamblaje y/o liberación de partículas víricas. Los experimentos confirmaron que la viabilidad de las células infectadas disminuía con el tratamiento, constatando que en el caso de la infección por FeLV era debida al desarrollo de apoptosis, y en el caso de FIV era debida a necrosis celular. Por tanto, el tratamiento con IFN redujo la liberación de partículas víricas, posiblemente asociada a la alteración de las membranas celulares durante la apoptosis y necrosis de las células, disminuyendo eficazmente la carga vírica y limitando la expansión de la infección a otras células...