Utilisation des bactériophages pour la prévention d'infections bactériennes en aquaculture.

摘要

Cette recherche participe aux efforts menés pour la protection d'un environnement sain tout enudvalorisant les activités économiques du pays. Les travaux dont il est question dans cet ouvrageudouvrent une nouvelle voie de recherche dans le domaine de la pisciculture voire même peut-être, desudélevages d'animaux en général. En effet, tout le secteur d'activités d'élevage des animaux est auxudprises avec le développement de bactéries résistantes aux antibiotiques au sein des populationsudanimales qui vivent dans le même environnement. Il en découle donc un risque de contaminationuddes plans d'eau naturels avoisinant les stations piscicoles par des souches bactériennes pathogènesudrésistantes aux antibiotiques ainsi que par des bactéries non pathogènes de la flore indigène portantuddes plasmides de résistance.udL'objectif de cette recherche était d'évaluer la possibilité d'utiliser des bactériophages, virusudbactériens, dans la prévention de l'établissement d'infections bactériennes rencontrées dans lesudélevages de poissons. Deux modèles ont été utilisés pour supporter cette hypothèse. L'un mettait enudrelation le bactériophage Ach1 et l'hydropisie causée par Aeromonas hydrophila chez la carpeudcommune (Cyprinus carpio). L'autre modèle faisait intervenir le bactériophage 65 et la furonculoseudcausée par Aeromonas salmonicida chez l'omble de fontaine (Salvelinus fontinalis).udIl a été démontré au cours de cette recherche avec les ombles de fontaine qu'il est possible deudretarder le développement d'une infection bactérienne par l'ajout d'un bactériophage dans l'eauudd'un aquarium où un poisson et un pathogène sont mis en présence. Il a également été démontréudqu'une variété importante de combinaisons de bactériophages différents pourraient être mises auudpoint et utilisées afin de contrer le développement et la propagation de résistances bactériennes à unudbactériophage prophylactique. Finalement, les bactériophages de A. salmonicida sont efficaces dansudune très grande proportion dans la lyse cellulaire des bactéries résistantes aux antibiotiques isoléesudde poissons d'élevages canadiens présentant des signes cliniques de la furonculose.udLes essais sur la carpe commune ont permis d'observer que la concentration de A. hydrophila dansudl'eau diminuait en fonction du temps pour augmenter dans le gravier et de constater que les poissonsudmis dans des aquariums de 70 litres munis de filtres au charbon développaient moins rapidementudune infection en absence de gravier au fond des aquariums que lorsque du gravier était ajouté. De plus, la durée du contact nécessaire avant l'établissement d'une infection a permis d'observerudl'évolution de l'état de santé des carpes et de déterminer de cette évolution en fonction du temps quiuda pu être utilisée pour les essais sur les ombles de fontaine et qui pourrait éventuellement êtreudutilisée pour plusieurs espèces.udLa première partie des essais sur le modèle « omble de fontaine» portait sur les interactions entre A.udsalmonicida, le bactériophage 65 et les ombles de fontaine ont été étudiés dans des aquariums deud70 L maintenus à 9°C. Les populations de A. salmonicida (10⁸UFC/mL) ont chuté de six log en 3udjours en présence du bactériophage 65 introduit à l'eau dans un facteur de multiplicité des infectionsud(MOI) de 1. La concentration des bactériophages et des bactéries de l'eau circulante des aquariumsudétait inférieure de 2 à 3 log à celle retrouvée dans l'eau interstitielle au gravier de fond. Leudbactériophage 65 a retardé de 10 jours l'apparition de la furonculose chez les ombles de fontaine.udFinalement, des cultures du bactériophage 65 de 10⁹UFP/mL ont connu une chute de la populationudd'un log en 80 jours lorsque conservées à 4 °C en milieu de culture liquide.udDans la seconde partie, des mutants de la bactérie étudiée, A. salmonicida HER1107, ont étéudsélectionnés afin de les utiliser comme cible pour 10 bactériophages du Centre de référence pourudvirus bactériens Félix d'Hérelle de Québec. Dans un premier temps, il a été vérifié si plus d'unudbactériophage du Centre de référence pour virus bactériens Félix d'Hérelle pouvait infecté A.udsalmonicida HER1107. Dans un deuxième temps, il a été vérifié si des mutants résistants auudbactériophage 65 étaient sensibles à un ou plusieurs bactériophages. Les résultats indiquent que lesudbactéries résistantes au bactériophage 65 se multiplient selon des temps de génération plus lents queudla souche originale et que le taux de réussite lors de repiquages en bouillon de culture TSA était trèsudfaible. Plus du quart des mutants isolés semblait retrouver le phénotype de la souche originale dès leudpremier repiquage en bouillon de culture TSA. Finalement, tous les mutants isolés se sont montrésudsensibles à trois bactériophages ou plus du Centre de référence pour virus bactériens. Ces résultatsudpermettent d'envisager l'utilisation de combinaisons de bactériophages pour de prochains essais deudtraitement préventif à base de bactériophages en aquaculture. Il est également suggéré que lesudsouches bactériennes résistantes aux bactériophages pourraient être moins agressives contre lesudpoissons compte tenu de la viabilité médiocre avec laquelle elles survivent en bouillon de culture.udDans la troisième partie, il a été vérifié que les bactéries résistantes aux antibiotiques actuellementuden usage au Canada peuvent être lysées par les bactériophages. Les résultats indiquent que desudsouches de A. salmonicida résistantes aux antibiotiques sont des cibles efficacement lysées par lesud12 bactériophages actuellement disponibles du Centre de référence pour virus bactériens Félixudd'Hérelle. Au moins 10 bactériophages ont lysé à des degrés différents chacune des populationsudbactériennes disponibles.udEn conclusion, il serait possible, en travaillant de pair avec les pisciculteurs et les médecinsudvétérinaires d'envisager sous peu l'utilisation de bactériophages sous forme de combinaisons etudmettre au point un protocole de prévention de la furonculose engendrée par A. salmonicida et éviteruddes pertes économiques importantes, tout en luttant contre la propagation des résistances auxudantibiotiques dans l'environnement.ud