Effets de mutations ponctuelles dans les régions conservées de la protéine de structure VP2 du virus B19

摘要

Les antiviraux les plus en développement sont, en général, spécifiques des enzymes virales. Cependant, le risque d 'émergence de virus résistants à de telles molécules n'est pas à exclure. Par conséquent, des stratégies alternatives ciblant d'autres étapes du cycle viral, tel que l'assemblage de la capside devraient être entreprises. Une telle approche nécessiterait une meilleure connaissance du processus régissant la formation de la capside. Le parvovirus B19 est un petit virus non enveloppé contenant un seul brin d'ADN de 5,5 kb. Sa capside comprend les protéines structurales VP1 et VP2. L'expression de VP2 dans le système baculovirus aboutit à la production de capsides recombinantes (VLPs). Nous avons exploité cette caractéristique, afin d'étudier les effets de mutations dans les régions conservées et stratégiques de la VP2 sur son assemblage en capside. Ces mêmes résidus ont également été mutés dans le clone infectieux du B19, dans le but de vérifier les phénotypes engendrés dans des cellules de mammifère. Les capsides recombinantes onCégalement servi de matrice pour la production d'anticorps recombinants (scFv) anti-VLPs, en utilisant la technique de présentàtion par les phages.udududDans le système baculovirus, nous avons pu, à l'aide de différentes techniques, mettre en évidence l'expression de VP2, ainsi que l'effet bloquant des mutations sur la formation de la capside. Malheureusement, ce résultat n'a pas pu être vérifié dans les cellules de mammifère. Par ailleurs, la spécificité de l'unique scFv que nous avons obtenu, a également pu être vérifiée.