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Funktionelle Charakterisierung spannungsabhängiger Calciumkanäle am Plexus myentericus der Ratte

机译:大鼠肌丛神经上电压依赖性钙通道的功能表征

摘要

Spannungsabhängige Calciumkanäle in isolierten Ganglien des Plexus myentericus neugeborener Ratten wurden pharmakologisch charakterisiert. Im Gegensatz zu früheren Arbeiten wurden isolierte Ganglien und nicht dissoziierte Neurone kultiviert, da diese nicht auf eine Rezeptorstimulation durch Neurotransmitter reagierten. Die Ganglien von drei bis elf Tage alten Ratten wurden enzymatisch isoliert und nach ca. 20 Stunden in Kultur mit dem Ca2+-sensitiven Fluoreszenzfarbstoff Fura-2-AM beladen und mit einer 35 mmol.l-1 KCl-Lösung superfundiert, um einen Anstieg der intrazellulären Ca2+-Konzentration ([Ca2+]i) via Depolarisation der Membran hervorzurufen. Dieser Anstieg der [Ca2+]i war sensitiv gegenüber Ni2+ und Co2+ ebenso wie gegenüber omega-Conotoxin MVIIA, omega-Agatoxin IVA und SNX-482. Die stärkste Hemmung wurde jedoch durch Nifedipin (5.10-7 mol.l-1) und omega-Conotoxin GVIA (4,3.10-7 mol.l-1) erreicht. Diese beiden Blocker hemmten auch den durch nicotinerge Rezeptorstimulation mittels Carbachol hervorgerufenen [Ca2+]i Anstieg. Folglich exprimieren isolierte myenterische Ganglien in Zellkultur verschiedene Typen von spannungsabhängigen Ca2+-Kanäle, von welchen der L- und der N-Typ die wichtigsten zu sein scheinen.TNFalpha Vorbehandlung dieser Ganglien über Nacht veränderte die [Ca2+]i-Antwort nach Carbachol-Gabe (5×10-5 mol×l-1), im Gegensatz zu Hyperpolarisation der Zelle und Potenzierung der durch nicotinerge Rezeptorstimulation hervorgerufenen Depolarisation, nicht signifikant. Ein direkter Einfluss von Eicosanoiden auf myenterische Neurone der Ratte konnte nur sehr bedingt gezeigt werden. Folglich scheinen Ca2+-Imaging Messungen nicht die geeignete Methode zur Untersuchung der Wirkung von Entzündungsreaktionen an enterischen Neuronen zu sein.
机译:新生大鼠的肌间神经丛神经节中的电压依赖性钙通道被药理学表征。与以前的工作相反,培养了孤立的神经节和未分离的神经元,因为它们对神经递质的受体刺激无反应。酶法分离三到十一日龄大鼠的神经节,在培养约20小时后,将它们加入Ca2 +敏感的荧光染料Fura-2-AM,并与35 mmol.l-1 KCl溶液进行超融合以增加通过膜去极化引起细胞内Ca2 +浓度([Ca2 +] i)。 [Ca2 +] i的增加对Ni2 +和Co2 +以及ω-芋螺毒素MVIIA,ω-藻毒素IVA和SNX-482敏感。然而,硝苯地平(5.10-7 mol.l-1)和ω-芋螺毒素GVIA(4.3.10-7 mol.l-1)获得了最大的抑制作用。这两种阻滞剂也抑制了由卡巴胆碱刺激烟碱能受体引起的[Ca2 +] i增加。结果,细胞培养物中分离的肌间神经节表达不同类型的电压依赖性Ca2 +通道,其中L型和N型似乎是最重要的。 5×10-5 mol×l-1),与烟碱能受体刺激引起的细胞超极化和去极化增强相反。类花生酸对大鼠肌层神经元的直接影响只能显示在非常有限的程度。结果,Ca 2 +成像测量似乎不是研究炎症反应对肠神经元影响的合适方法。

著录项

  • 作者

    Schäufele Nina;

  • 作者单位
  • 年度 2004
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  • 正文语种 ger
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