Cloning and expression of CYP2D6*1 and CYP2D6*10 and its application in vitro drug-herbs interaction studies

摘要

CYP2D6 mempakan salah satu enzim CYP utama dania bertanggungjawabuddalam metabolisma kira-kira 20% daripada ubat-ubatan yang terdapat pada masaudkini. CY2D6 adalah berpolymorfisma dan CYP2D6* 10 mempakan alelle kebiasaanuddi kalangan populasi Malaysia. Dat1. berkenaan interaksi herbal tempatan-ubatanudadalah kekurangan. Objektif penyelidikan ini adalah menghasilkan assei in vitroudberkenaan interaski ubatan-herbal dan mengunakannya untuk menganalisasi interaksiudherbal tempatan. CYP2D6*1 rekombinan telah dihasilkan dan diekpreskan bersamaudCYP-reductase dalam bacteria E. coli. CYP2D6* 10 dihasilkan dengan kaedah "sitedirectedudmutagenesis" dan diekpreskan sebagai CYP2D6* 1.ududCYP2D6 is one of the maJor CYPs enzymes and is responsible for theudmetabolism of about 20% of cunently available therapeutic chugs. CYP2D6 isudpolymorphic and CYP2D6* 10 is the common allele in the Malaysian population.udThere is lack of data on local herbal-drug interaction. The objective of this study wasudto generate an in vitro drug-herbs int1eraction assay and use it to analyse local herbudinteraction. Recombinant CYP2D6* 1 was generated and co-expressed with CYPreductaseudin E. coli. Recombinant CYP2D6*10 was generated using site-directedudmutagenesis and expressed as CYP2D6* 1.ud