Validation d'une méthode de dosage immunoturbidimétrique des D-Dimères chez le chien

摘要

L'objet de cette thèse est la validation d'une méthode immunoturbidimétrique de dosage quantitatif des D- Dimères chez le chien. Dans l'étude bibliographique, les fondements de la physiologie de l'hémostase sont rappelés avant d'aborder la Coagulation IntraVasculaire Disséminée (CIVD) et son diagnostic. Cette affection dans laquelle coexistent des phénomènes de thromboses par hyperactivation de la coagulation et un état d'hypocoagulabilité par consommation des facteurs et plaquettes, entraîne l'activation du système fibrinolytique qui tente de détruire les dépôts de fibrine formés. Ainsi, les marqueurs de fibrinolyse constituent des outils majeurs du diagnostic des CIVD. Parmi eux, les D-Dimères sont aujourd'hui les plus spécifiques d'une fibrinolyse secondaire à la coagulation, alors que les Produits de Dégradation de la Fibrine et du fibrinogène(PDF), utilisés actuellement en routine en médecine vétérinaire, ne permettent pas de distinguer hyperfibrinolyse secondaire et hyperfibrinogénolyse primitive. Des tests de dosage des D-Dimères semi-quantitatifs sur latex ont déjà été validés chez le chien ainsi qu'une méthode immunoturbidimétrique sur un kit Boehringer-mgelheim. Dans l'étude expérimentale, l'auteur a testé le kit Sta-Liatest D-Di, commercialisé par Stago sur 24 plasmas citrates prélevés sur trois groupes de chiens : sains (n = 6), atteints de CIVD (n = 8) et atteints de troubles autres qu'une CIVD (n = 10). La technique a montré une bonne précision (répétabilité et reproductibilité avec des CV inférieurs à 15%) et une linéarité correcte (r2 = 0.96 à 0.99) sauf dans les valeurs basses. Les études de recouvrement se sont avérées concluantes (r2 = 0.98). Les effets du mode de conservation sur les concentrations mesurées ont été établis : les plasmas peuvent être conservés 8 heures à température ambiante et 5 cycles décongélation/recongélation n'affectent pas les concentrations en D-Dimères.