Determination of protein content and fatty acid profile in milk of Girgentana goat breed for evaluation of nutritional characteristics udof dairy products

摘要

I geni delle caseine caprine mostrano un elevato polimorfismo, che influenza non solo la quantità di caseine nel latte ma anche le caratteristiche strutturali e nutrizionali e le proprietà tecnologiche del latte. Uno degli obiettivi di questa tesi è stato quello di separare e quantificare le più comuni varianti alleliche caseiniche nel latte di capra di razza Girgentana, una razza autoctona siciliana, e di valutare l’effetto dei polimorfismi caseinici sul contenuto di caseina nel latte.udI genotipi e, quindi, gli alleli ai diversi geni delle caseine sono stati rilevati utilizzando protocolli di PCR, PCR-RFLP, AS-PCR e analisi di sequenziamento. I campioni di latte sono stati preparati seguendo il metodo proposto da Bobé et al. (1998) e analizzati mediante metodo RP- HPLC. È stata utilizzata una colonna analitica in fase inversa C8 (Zorbax 300SB - C8 RP, 3.5μm, 300A, 150 × 4.6 ID ) e la rilevazione è stata effettuata ad una lunghezza d'onda di 214 nm. La procedura è stata sviluppata utilizzando campioni di latte individuale crudo di capre di razza Girgentana. Per gli esperimenti di calibrazione, le varianti genetiche pure sono state estratte da campioni di latte individuale di animali con genotipo noto, in quanto commercialmente non erano disponibili le varianti alleliche estratte da latte caprino. In particolare, sono stati utilizzati animali con genotipo alla alphas1-caseina AA, BB, FF e NN, genotipo alla beta-caseina CC e C'C', genotipo alla alphas2-caseina AA e FF, e genotipo alla kappa-caseina AA e BB. La validazione del metodo prevedeva il test di linearità e le stima di ripetibilità, riproducibilità e precisione. Una relazione lineare è stata osservata tra le concentrazioni delle proteine e le aree sottese dal picco nell’intervallo di concentrazione in analisi, con l’ottenimento di limiti di rilevabilità bassi. La ripetibilità e riproducibilità sono risultate soddisfacenti sia per i tempi di ritenzione e che per le aree sottese ai picchi.udUn altro obiettivo di questa tesi è stato quello di studiare le interazioni tra nutrizione e genotipo al locus dell’s1-caseina (CSN1S1) caprina, valutando l’impatto delle diete a base di foraggio fresco e di un supplemento energetico sui profili di caseina e di acidi grassi (FA) nel latte di capra di razza Girgentana. Dodici capre sono state selezionate aventi lo stesso genotipo ai loci di s2-caseina, β-caseina e κ-caseina, e differente genotipo alla CSN1S1: omozigote per alleli forti (AA) o eterozigoti per alleli forti e deboli (AF). Le capre di ciascun genotipo sono state divise in tre gruppi e alimentate ad libitum con tre diete, secondo un disegno di quadrato Latino 3×3: foraggio fresco, Sulla, (SFF), SFF più 800 g/d di orzo (SFB), fieno misto più 800 g /d di orzo (MHB).