Detection of gene amplification in MYCN, C-MYC, MYCL1, ERBB2, EGFR, AKT2, and human papilloma virus in samples from cervical smear normal cytology, intraepithelial cervical neoplasia (CIN I, II, III), and cervical cancer

摘要

Introduction: Cervical cancer is the second most common cancer among women worldwide and the second cause ofudcancer mortality in women. It has been demonstrated that the process of cervical carcinogenesis displays genetic andudenvironmental epigenetic components. Currently, research is focused on new prognosis markers like oncogene amplification.udObjectives: To perform detection of MYCN, C-MYC, MYCL1, ERBB2, EGFR, and AKT2 amplification. Additionally,udto detect human papillomavirus in samples from normal cytology smear, cervical intraepithelial neoplasia (CIN) I, II, and IIIudand cervical cancer patients.udMethods: Papillomavirus (HPV) genotyping by reverse line blot (RLB) performed and gene amplification by detectionudwith real-time PCR with Taqman probes.udResults: HPV was present in 4% of the patients with normal cytology, 48% in CIN I, 63.6% in CIN II, 64% in CIN III,udand 70.8% in cervical cancer. Genes amplified in cervical cancer were MYCN (39.1%), ERBB2 (34.7%), and MYCL1 (30.4%);udshowed higher amplification in high-grade lesions and cervical cancer in relation to low-grade lesions and normal cytologyudwith statistically significant differences. Besides the genes, C-MYC, EGFR, and AKT2 were amplified in samples fromudpatients with cervical cancer by 12%, 18%, and 13%, respectively; we did not find statistical differences.udIntroducci?n: El c?ncer cervical es el segundo c?ncer m?s importante en mujeres a nivel mundial y es la segunda causaudde muerte por c?ncer en mujeres. Se ha demostrado que el proceso de carcinog?nesis cervical presenta componentes tantoudgen?ticos como epigen?ticos y medio ambientales. En la actualidad, hay gran inter?s en la b?squeda de marcadoresudmoleculares asociados con la progresi?n de esta enfermedad, uno de los posibles mecanismos y que adem?s est? pocoudestudiado en c?ncer cervical es la amplificaci?n g?nica de algunos oncogenes como la familia MYC, EGFR y AKT entre otros.udObjetivos: Detectar la amplificaci?n g?nica de MYCN, C-MYC, MYCL1, ERBB2, EGFR y AKT2 adem?s de la presenciauddel virus de papiloma humano en cepillados cervicales en mujeres con citolog?a normal o con neoplasia intraepitelial cervicalud(NIC) I, II y III o con c?ncer cervical.udM?todos: Se genotipific? mediante reverse line blot (RLB) el virus de papiloma humano (VPH) y se determin? el estado de amplificaci?n g?nica de los genes mencionados medianteudPCR en tiempo real utilizando sondas taqman.udResultados: El VPH se encontr? presente en 4% de lasudpacientes con citolog?a normal, en 48% en NIC I, 63.6% enudNIC II, 64% en NIC III y 70.8% en c?ncer cervical. Los genesudMYCN, MYCL1 y ERBB2 mostraron mayor amplificaci?n enudlesiones de alto grado y c?ncer con diferencias estad?sticamenteudsignificativas a las lesiones de bajo grado y citolog?audnormal, en 39.1%, 34.7% y 30.4% respectivamente. Adem?s,udse encontraron amplificados los genes C-MYC, EGFRudy AKT2, en muestras de pacientes con c?ncer cervical, enud12%, 18% y 13% respectivamente. Sin embargo, no seudobservaron diferencias estad?sticamente significativas conudrespecto a las lesiones de alto y bajo grado y citolog?a normal.udConclusi?n: En las lesiones de alto grado como en c?ncerudcervical, se encuentra mayor prevalencia del virus al igualudque se detectan mayor cantidad de alteraciones gen?ticasudcomo la amplificaci?n g?nica.