Validación del método filtración por membrana para análisis microbiológico de coliformes totales y Escherichia coli en aguas marinas

摘要

Se describe la validación del método filtración por membrana, a través de la técnica recuento de colonias utilizando el medio de cultivo agar Chromocult para coliformes totales y Escherichia coli en aguas marinas realizada en el laboratorio del Centro de Investigaciones Oceanográficas e Hidrográficas del Caribe, Área de Microbiología. Antes de llevarse a cabo el ensayo de validación se realizaron controles de aseguramiento de la calidad que permitieron garantizar las condiciones de esterilidad de las superficies de trabajo, limpieza y desinfección del laboratorio, equipos, condiciones ambientales de temperatura y humedad, calidad del aire en cada una de las zonas donde se desarrollaron las etapas que involucraron el proceso de validación; así como la preparación y esterilización de los medios de cultivo, material de vidriería y análisis de las muestras. Lo anterior, con la finalidad de facilitar la realización correcta del ensayo y por consiguiente que no se invalidara, afectara, ni comprometiera la calidad y resultados del mismo. Se tomaron cuatro (04) muestras de agua de mar de tipo superficial, con cinco (05) réplicas cada una, procedentes del muelle ubicado en el Centro de Investigaciones Oceanográficas e Hidrográficas del Caribe en Cartagena de Indias. Para llevar a cabo el procesamiento de las muestras se utilizó el método normalizado; es decir, basado en normas, filtración por membrana, contemplado en el Standard Methods. Por tal motivo fue validado para verificar que el contenido y las aportaciones incluidas mantienen el método de ensayo adecuado para el uso previsto. En el proceso de validación se estimaron los valores para los parámetros de repetibilidad y reproducibilidad; así mismo se demostró que el método validado de filtración por membrana en aguas marinas para la determinación de coliformes totales y E. coli fue repetible, reproducible y preciso con un 95 % de confianza; por lo tanto el método es adecuado para ser aplicado en el Área de Microbiología del laboratorio del CIOH empleando la matriz agua marina.