乙醇对锯缘青蟹碱性磷酸酶活力与构象的影响

摘要

应用荧光光谱、紫外吸收光谱研究锯缘青蟹碱性磷酸酶经乙醇微扰后的分子构象变化情况。乙醇对酶分子构象有显著的影响 ,酶的内源荧光强度随乙醇浓度增大而增强 ,荧光发射峰逐渐发生红移 ,说明酪氨酸、色氨酸残基的微环境发生明显的变化 ;紫外吸收光谱在 2 78nm吸收峰随乙醇浓度增大而增强。这些结果表明 ,酶蛋白分子中的生色基团残基的微环境发生变化 ;酶的剩余活力随着乙醇浓度增大而迅速下降 ,经乙醇失活的酶在正常的测活体系中监测酶活力 ,发现酶活力可以回升到 92 %以上 ,说明酶的乙醇失活是可逆的 ,可以通过稀释复活。测定乙醇对酶的抑制动力学 ,表明乙醇对青蟹碱性磷酸酶的抑制作用是反竞争性机制 ,其抑制常数Ki为 1 1 .8%。