Un metodo di separazione e purificazione delle particelle ribosomiche 70S di Escherichia coli

摘要

Si descrive un metodo di preparazione di particelle ribosomali,che permette di raccogliere, in notevole quantità, particelle omogenee con coef ficiente di sedimentazione di 7OS. Il metodo è stato usato a partire da un estratto ribosomico di Escherichia coli in tampone tris-HCl a pH =7, 4 e contenente ioni Mg++ alla concentrazione di 10-2M. L'estratto riboso¬mico è stato trattato con RNA-asi pancreatica in quantità opportune, per idrolizzare i poliribosomi (in particolare i dimeri 100S)ele subunità pre¬senti. Per isolare le particelle 70S (le quali resistono all'azione dell'en zima) allo stato puro, e per eliminare i residui della digestione enzima tica, è stata utilizzata la tecnica della gel-filtrazione su colonna di "sepharose".