A fertozo bronchitis vírus, a csirke nephritis vírus és a fertozo bursitis vírus kimutatása multiplex RT-PCR alapú diagnosztikai eljárással

摘要

A "nephroso-nephritis"-ként ismert kórkép és a koszvény világszerte jelentos veszteségeket okoz a baromfiállományokban. A regresszív és gyulladásos veseelváltozások hátterében számos, nem fertozo jellegu kórok állhat, de ugyanakkortobb vírusos fertozés is szerepet játszhat a kórforma kialakulásában. Ez utóbbiak kozul a legismertebbek a fertozo bronchitis vírus (infectious bronchitis virus - IBV) és a csirkék nephri-tisét okozó vírus (avian nephritis virus - ANV), de kulonbozo veseelváltozásokat a fertozo bursitis vírus (infectious bursal disease virus - IBDV) okozta fertozések esetében is leírtak már. A szerzok egy új, reverz transzkripciót koveto, multiplex polimeráz láncreakción (mRT-PCR) alapuló diagnosztikai eljárást mutatnak be, amely az említett vírusok egyideju kimutatására szolgál. Az újonnan tervezett eljárás gyorsabb és kisebb koltséget igényel, mint a korábban említett kórokozók egyenkénti kimutatása, ugyanakkor megbízható és specifikus. Az eljárásban használt primerpárok a kulonbozo kórokozók genomjának konzervatív régióit erosítik fel, majd az így kapott amplikonok a gélelektroforézist kovetoen jól elkulonulo csíkokat eredményeznek. Az eljárás érzékenységét ismert nukleinsav-koncentrációjú, pozitív kontrollok tízes alapú logaritmikus hígításain vizsgálták: az újonnan tervezett mRT-PCR az IBDV esetében 8,45 x 10~(-2) mug, az IBV esetében 8,87 x 10~(-3) mug, míg az ANV esetében 8,92 x 10~(-3) mug nukleinsav-koncentrációjú minta felhasználásával is pozitív eredményhez vezetett. Az érzékenységi vizsgálat eredménye szerint az újonnan tervezett eljárás jelentosen csokkenti a koltségeket és a megállapítás idejét,anélkul hogy kedvezotlenul befolyásolná a diagnosztikai próba megbízhatóságát és érzékenyégét.