Entwicklung eines leistungsfahigen Extraktionssystems zur Isolierung von Nuclein- saure aus Fleisch und Fleischerzeugnissen für die PCR

摘要

Vorgestellt wird ein Extraktionssystem in zwei Variationen zur Gewinnung reiner Nucleinsaurelosungen aus Fleisch und Fleischwaren. Die einfache Handhabung der Saulenmethode entspricht der eines kommerziell erhaltlichen Kits und eignet sich besonders zur Aufkonzentrierung von Nucleinsaure bei Proben mit geringen DNA-Gehalten. Nachteilig erweisen sich bei diesem System die hohen Material-kosten für die Saulen. Mit einer alternativen Methode wird eine preisgünstige Variante für die DNA-Extraktion vorgestellt. Beide Methoden zeigen hinsichtlich Ausbeute, Reproduzierbarkeit und Reinheit vergleichbare Ergebnisse. Die hohe Ausbeute erlaubt es, selbst geringste Mengen an DNA aus prozessierten Lebensmitteln tierischen Ursprungs zu isolieren. Die gewonnenExtrakte konnen ohne weitere Reinigungsschritte für die PCR eingesetzt werden und haben eine Lagerstabilitat von mehreren Wochen bei -18°C.