ВЛИЯНИЕ ИНАКТИВАЦИИ РАЗЛИЧНЫХ КОМПОНЕНТОВ СИГНАЛЬНЫХ ПУТЕЙ ОПУХОЛЕВОГО СУПРЕССОРА р53 НА СТАБИЛЬНОСТЬ ГЕНОМА

摘要

Для выяснения роли отдельных р53-регулируемых сигнальных путей в контроле целостности генома изучена частота числовых и структурных хромосомных аберраций в культурах мышиных первичных эмбриональных фибробластов с "нокаутированными" генами белков р53, p21~(WAF) (мишень трансактивационного действия р53, ответственная за остановку поврежденных клеток в G_1-фазе клеточного цикла), pRb (мишень p21~(WAF), контролирующая переход из S] в S-фазу) и p19~(ARF) (обеспечивает активацию р53 при некоторых аномалиях). Показано, что инактивация любого из этих генов вызывает значительное увеличение частоты возникновения изменений кариотипа. Однако степень их влияния на хромосомную стабильность различна: наибольшая частота возникновения как спонтанных, так и индуцированных этилметансульфонатом (ЭМС) разрывов хромосом обнаруживалась в клетках с инактивированным р53, наименьшая - при инактивации pRb. Эти различия, по-видимому, не связаны с дифференциальным эффектом инактивации тестированных генов на регуляцию клеточного цикла: во всех сублиниях наблюдались отмена остановки поврежденных клеток в G_1 и сохранение функции "сверочной точки" (checkpoint) в G2. Однако в исследованных сублиниях выявлены различия в индукции апоптоза после воздействия ЭМС. Наименьшее число апоптотиче-ских ядер обнаруживалось в культурах р53-/-, наибольшее - в культурах Rb-/-. Очевидно, степень генетической нестабильности является результирующей нарушений регуляции сверочных точек клеточного цикла и апоптоза.