СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЭКСПРЕССИИ НАТИВНОГО И МОДИФИЦИРОВАННОГО ГЕНОВ cry3a Bacillus thuringiensis В ПРОКАРИОТИЧЕСКИХ И ЭУКАРИОТИЧЕСКИХ КЛЕТКАХ

摘要

Клонирован ген cry3a Bacillus thuringiensis. На основе последовательности гена синтезирован модифицированный ген cry3aM с оптимальным кодоновым составом для эффективной экспрессии в клетках эукариот. Сконструированы гибридные гены cry3a-licBM2 и cry3aM-licВМ2, в которых последовательности нативного и модифицированного генов слиты в рамки считывания с репортерным геном, кодирующим термостабильную лихеназу. Показано, что уровни экспрессии гибридных генов cry3a-licBM2 и cry3aM-licBM2 в клетках Escherichia coli сравнимы и составляют 5% от таковых для репортерного гена licВМ2. В клетках низших эукариот Saccharomyces cerevisiae уровень экспрессии гибридного гена cry3aM-licВМ2, в состав которого входит модифицированный ген, значительно выше, чем уровень экспрессии cry3a-licВМ2, в состав которого входит нативный ген. Показано, что присутствие лихеназы в составе гибридных белков облегчаетпроведение отбора и анализа уровня экспрессии гибридных белков в трансгенных организмах.