Получение делеционных мутантов является одним из основных подходов к исследованию функции генов. Известные методы введения направленных делеций в геном дрозофилы имеют низкую эффективность и трудоемки. Нами описан новый метод получения делеций генов у дрозофилы, который имеет высокую эффективность и упрощает получение делеционных мутантов. Система основана на введении сайтов узнавания мегануклеазами l-Scelи -Сге и гомологичного участка в интересующий район хромосомы с помощью attB-содержащей конструкции, последующем внесении двунитевых разрывов с помощью мегануклеаз и репарации по участкам гомологии. Описанный метод позволяет получить делению от attP-элемента до интересующего участка генома. Предложена кассета, позволяющая на ее основе делать в один шаг конструкции для делеций любого участка. Подобраны маркеры, упрощающие отбор репарационных событий. Эффективность метода подтверждена делецией размером 47тпн, включающей ген qtc.
展开▼
