ИСПОЛЬЗОВАНИЕ FLUO-3 AM ДЛЯ ИЗМЕРЕНИЯ УРОВНЯ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОГО КАЛЬЦИЯ В ТРОМБОЦИТАХ МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОФЛУОРИМЕТРИИ

摘要

Целью данного исследования была оценка возможности применения метода тромбининдуцированного увеличения концентрации Са2* в цитоплазме Fluo-3-окрашенных тромбоцитов в качестве экспериментальной модели для изучения механизма действия антитромбоцитарных препаратов in vitro. Влияние антитромбоцитарных веществ на тромби-ниндуцированное увеличение уровня цитоплазматического Са2+ в тромбоцитах изучали на примере ацетилсалициловой кислоты (АСК). Измерение концентрации цитоплазматического Са2+ проводили методом проточной цитометрии с помощью флуоресцентного зонда Fluo-3 AM. Установлено, что в данном тесте АСК ингибирует тромбининдуцированное увеличение цитоплазматического Са2+ при концентрациях 0,125—5,0мк/моль. Это свидетельствует о том, что в механизме действия АСК угнетение тромбоксанового пути перестает быть ведущим. Предложенный нами методический подход позволяет оценить антитромбоцитарный эффект веществ по их влиянию на уровень цитоплазматического Са2+ в тромбоцитах in vitro, однако обладает рядом ограничений, препятствующих широкому применению данного метода.