ИССЛЕДОВАНИЕ АДЬФА-САТЕЛЛИТНЫХ ДНК В СОСТАВЕ КОСМИДНЫХ БИБЛИОТЕК, СПЕЦИФИЧНЫХ ДЛЯ ХРОМОСОМ 13, 21 И 22, С ПОМОЩЬЮ ФЛЮОРЕСЦЕНТНОЙ ГИБРИДИЗА

摘要

С помощью флюоресцентной гибридизации in situ (FISH) проведено картирование альфа-сателлит-ных ДНК, выявленных в составе космидных библиотек,специфичных для хромосом 13. 21 и 22 человека. Всего выявлен 131 космидный клон, включающий различные элементы центромерной аль-фоидной ДНК акроцентрических хромосом, в том числе соседствующие с SINE, LINE и классическими сателлитными последовательностями ДНК. В составе гетерохроматина акроцентрических хромосом идентифицированы две различные группы альфоидных последовательностей: 1) локализованных непосредственно вблизи центромерных районов (локусы альфа!3-1, альфо21-1,алъфа22-1) и 2) в коротких плечах акроцентрических хромосом (локусы альфа!3-2, альфа21-2, альфа22-2). Альфо-идные последовательности ДНК из локусов альфа13-2,21-2,22-2, по-видимому, не выполняют цен-тромерную функцию и отсутствуют в митотически стабильных маркерных хромосомах с делетиро-ванными короткими плечами, робертсоновских транслокациях t(13q; 21q), t(14q; 22q) и хромосомах 21р-.Показано, что гетерохроматиновые районы хромосом 13, 21 и 22 содержат также повторяющиеся последовательности с "относительной хромосомной специфичностью" из различных семейств альфоидной ДНК, представленных большим количеством копий в других хромосомах. Пулы центромерных альфоидных космид представляют собой полезный источник для дальнейших исследований структурных и функциональных особенностей ДНК гетерохроматина и идентификации последовательностей центромер. Кроме того, эти клоны могут быть использованы для высокоразрешающего картирования и секвенирования гетерохроматиновых районов генома человека. Детальный анализ с помощью FISH большого числа альфоидных космидных клонов позволил идентифицировать ряд новых, высокоэффективных ДНК-проб для молекулярно-цитогенетических исследований - в частности, для интерфазного и метафазного анализа хромосом 2, 9, 11, 14, 15, 16,18.20,21 и 13, 22 и 14, X.