ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ФРАГМЕНТОВ 85- И 120-МДа ПЛАЗМИД Azospirillum brasilense Sp245 ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ПЛАЗМИДНОЙ ПЕРЕСТРОЙКИ У ЭТОЙ БАКТЕРИИ И ДЛЯ ПОИСКА ГОМОЛОГИЧ

摘要

Спонтанная утрата мутантом Azospirillum brasilense Sp245.5 85-МДа (р85) и 120-МДа (р120) реплико-нов при одновременном образовании новой плазмиды с молекулярной массой более 300 МДа сопровождается появлением дефектов в синтезе О-специфических и связывающих калькофлуор полисахаридов и не влияет на жгутикование и подвижность этой бактерии. Для изучения данной плазмид-ной перестройки использована гибридизация ДНК штамма Sp245 дикого типа и мутанта Sp245.5 с фрагментами р85 и р120, несущими локусы, вовлеченные в образование полярного (fla) и латеральных (laf) жгутиков, О-специфических и связывающих калькофлуор полисахаридов (lps/cal), в определение плавания (mot) и роения (swa) азоспирилл. Результаты гибридизации с фрагментами р120 свидетельствуют о включении немодифицированных noкycoв fla/swa и измененных локусов lps/cal в состав новой мегаплазмиды. Обнаружены два EcoRI-фрагмента, гомологичных noкycoy fla/laf/mot/swa из р85, в ДНК A. brasilense Sp245 и сохранение одной из копий в ДНК мутанта Sp245.5. Использование вышеназванных зондов для гибридизации с ДНК A. brasilense Sp7 позволило впервые выявить сильно выраженную гомологию фрагментам р120 в 90-МДа плазмиде и фрагменту р85 -в 115-МДа плазмиде Sp7.