КОНСТРУИРОВАНИЕ ИСКУССТВЕННЫХ ФНО-СВЯЗЫВАЮЩИХ БЕЛКОВ НА ОСНОВЕ 10-ГО ДОМЕНА ФИБРОНЕКТИНА III ТИПА С ПОМОЩЬЮ БАКТЕРИАЛЬНОГО ДИСПЛЕЯ

摘要

Конструирование аналогов антител на основе альтернативных каркасных белков представляет собой перспективную стратегию создания новых лекарственных и биотехнологических препаратов. Целью настоящей работы явилась оптимизация системы клеточного дисплея вариантов каркасного белка 10-го домена фиб-ронектина человека III типа (Fn3) на основе аутотранспортера AT877 Psychrobacter cryohalolentis K5 и получение новых искусственных белков, связывающих фактор некроза опухолей (ФНО). Нами сконструирована комбинаторная библиотека генов вариантов Fn3 и проведена ее селекция методом бактериального дисплея. В результате экспрессии генов отобранных вариантов Fn3 в Escherichia coli и скрининга ФНО-связывающей активности выявлены белки, обладающие наиболее высокой аффинностью, и изучены их свойства.