ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДУПЛЕКС-СПЕЦИФИЧЕСКОЙ НУКЛЕАЗЫ КРАБА ДЛЯ БЫСТРОГО АНАЛИЗА ОДНОНУКЛЕОТИДНЫХ ПОЛИМОРФИЗМОВ И ВЫЯВЛЕНИЯ ДНК-МИШЕНЕЙ В КОМПЛЕКСНОМ ПРОДУКТЕ ПЦР

摘要

Предложен метод быстрого анализа однонуклеотидных полиморфизмов и выявления целевых клонов при клонировании сложных продуктов ПЦР с использованием дуплекс-специфической нуклеазы краба и универсального флуоресцентного зонда. Метод является альтернативой трудоемких процедур скрининга клонов с применением радиоактивно меченных зондов, рестриктного анализа с нанесением на гель и дорогостоящего секвенирования. Эффективность метода продемонстрирована в ряде модельных экспериментов.