АМИНОКИСЛОТНАЯ ЗАМЕНА В БЕЛКЕ ОРТ6 ВИРУСА ТАБАЧНОЙ МОЗАИКИ ПРЕПЯТСТВУЕТ ОБРАЗОВАНИЮ КОМПЛЕКСА С eEF1A И КООПЕРАТИВНОМУ СВЯЗЫВАНИЮ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ in vitro

摘要

Фактор элонгации трансляции eEF1A играет существенную роль в жизненном цикле вируса табачной мозаики (ВТМ). eEF1A взаимодействует с тРНК-подобной структурой и двумя псевдоузлами в 3'-нетранслируемой области (З'-НТО) РНК ВТМ, а также взаимодействует с метил-грансферазным доменом РНК-зависимой РНК-полимеразы и белком ОРТ6. В данной работе было изучено взаимодействие eEF1A с белком ОРТ6 ВТМ штамма L (OPT6-L), а также набором мутантов OPT6-L и ОРТ6 ВТМ штамма К (ОРТ6-К) in vitro. Показано, что замена остатка изолейцина на остаток треонина в положении 11 OPT6-L и ОРТ6-К (замена И IT) блокирует образование комплекса с eEF1A. Обнаружено, что белок ОРТ6 способен кооперативно связывать нуклеиновые кислоты. Выявлено, что замена И IT, помимо влияния на взаимодействие с eEF1A, также ведет к потере кооперативности связывания нуклеиновых кислот с белком ОРТ6.