ФАКТОР УГНЕТЕНИЯ МИГРАЦИИ МАКРОФАГОВ (MIF) ИЛОВОГО КРАБА Scylla paramamosain: МОЛЕКУЛЯРНОЕ КЛОНИРОВАНИЕ, ПРОФИЛИ ЭКСПРЕССИИ В РАЗЛИЧНЫХ ТКАНЯХ И ПРИ ЗАРАЖЕНИИ БАКТЕРИЕЙ Vibrio

摘要

Один из первых обнаруженных цитокинов — фактор угнетения миграции макрофагов (MIF) — выполняет важные функции в различных физиологических процессах у краба. В данной работе клонировали полноразмерную к. 111К MIF (GenBank асе n JX131610) из илового краба Scylla paramamosain (Sp) на основе последовательности из библиотеки его кДНК. Полноразмерный ген SpMIFсостоит из 734 п.н. с открытой рамкой считывания длиной в 363 п.н., кодирующей пептидную цепь SpMIF длиной 120 а.о. (мол. вес 13.46 кДа, р/6.82). Сравнительный анализ первичной структуры показал, что ген SpMIFu такой же ген из китайского краба Eriocheir sinensis высокогомологичны (68%). Методом количественной ПЦР в реальном времени показано, что в клетках гепатопанкреаса и в гемоцитах уровень экспрессии гена SpMIF высок. После заражения бактерией Vibrio parahaemolyticus (4.00 х 10" БОЕ/мл) уровень синтеза SpMIF через 6 ч повышается, достигает максимума через 8 ч и снижается до нормального уровня через 48 ч. Эти данные свидетельствуют о том, что ген успешно клонирован и, по-видимому, является частью иммунной системы краба.