СОЗДАНИЕ МЕТОДОВ СРАВНИТЕЛЬНОГО ПРОТЕОМНОГО АНАЛИЗА МОЧИ БЕРЕМЕННЫХ И НЕБЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРОЦЕССОВ, ПРОТЕКАЮЩИХ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ

摘要

Цель исследования. Получение экспериментальных данных о протеоме мочи беременных при физиологической беременности для повышения диагностической значимости выявляемых в моче маркеров различных заболеваний.Материал и методы. Для стандартизации протокола сбора мочи были отобраны образцы мочи 10 небеременных женщин в возрасте от 24 до 34 лет. Выбрана вторая утренняя моча как объект исследования и время 20 минут как рекомендуемое время хранения образца на льду до предварительной обработки. Для стандартизации протокола сбора мочи беременных для последующего протеом-ного анализа были отобраны образцы мочи 10 женщин на 15-17-й неделе беременности в возрасте от 23 до 35 лет, с нормально протекающей беременностью с общим содержанием белка в моче не выше 100мкг/мл (отсутствие протеинурии). Пробы мочи анализировались на базе нанопоточного высокоэффективного жидкостного хроматографа (нано-ВЭЖХ, nano-HPLC) Agilent 1100 (Agilent, США) и масс-спектрометра FinniganLTQ FT' (ThermoElectron, Бремен, Германия).Результаты. Разработан и стандартизирован протокол выделения белковых экстрактов из проб мочи, включающий процедуру первичного отбора проб мочи у пациенток и экстрагирование белковых смесей из проб мочи. Входе исследования показана высокая воспроизводимость и информативность протеомных данных состава мочи беременных, что позволяет нам предложить данный протокол для определения изменений протеома мочи, связанных с беременностью, определения характерных качественных изменений белкового профиля мочи при беременности, исследования возможности использования выявленных белковых молекул в качестве биомаркеров для ранней диагностики различных заболеваний, связанных с беременностью.