ЭКСПРЕССИЯ ДНК-КОДИРУЕМОГО АНТИДОТА К ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИМ ТОКСИНАМ В МЕТИЛОТРОФНЫХ ДРОЖЖАХ Pichia pastoris

摘要

Впервые представлена платформа по клонированию и экспрессии активной бутирилхолинэстеразы (БуХЭ) человека в дрожжевой системе Pichia pastoris. На основе вектора pPICZaA созданы генетические конструкции для экспрессии гена БуХЭ отдельно и совместно с пролинбогатым пептидом (PRAD). Показано, что наибольший уровень продукции достигался при экспрессии гена БуХЭ без PRAD pPICZaA. Установлено, что при оптимальной кислотности среды(рН 7.6), оптической плотности посевной культуры 3 о.е. и оптимального режима добавления метанола (0.5% метанола в первые сутки и начиная со вторых сут по 0.2% каждые последующие) удается получать до 125 мкг активного фермента из 1 л культуральной среды.