ИССЛЕДОВАНИЕ НАКОПЛЕНИЯ БЕЛКА RecA Bacillus subtilis В МИТОХОНДРИЯХ РЕКОМБИНАНТНОГО ШТАММА ДРОЖЖЕЙ Yarrowia lipolytica

摘要

Получен штамм Yarrowia lipolytica, несущий интегративную генетическую конструкцию pQ-SRUS, отвечающую за продукцию белка RecA бактериального происхождения с митохондриальной локализацией. Проведена оценка общего уровня продукции этого белка в рекомбинантных клетках и митохондриях Y. lipolytica. Адресация рекомбинантного белка RecA в митохондрии обеспечивалась за счет лидерных последовательностей мРНК гена SOD2 (5'-UTR и З'-UTR), обладающих сродством к внешней поверхности митохондрий, и обеспечивающих котрансляционный транспорт RecA внутрь митохондрий. Штамм К lipolytica, несущий конструкцию pQ-SRUS, обладал способностью накапливать белок RecA внутри митохондрий, что показано методом иммуноблоттинга очищенных препаратов митохондрий.