ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА АЦЕТОЛАКТАТСИНТАЗЫ И АЦЕТОЛАКТАТДЕКАРБОКСИЛАЗЫ ИЗ КУЛЬТУРЫ LACTOCOCCUS LACTIS

摘要

Из клеток молочнокислых бактерий Lactocaccm lactis suhsp. lactis biovar. diacetylactis, штамм 4; выделены и частично очищены ацетолактатсинтаза (АцЛС) и ацетолактатдекарбоксилаза (АцЛДК), катализирующие синтез и последующее превращение сс-ацетолактата (АцЛ). Препарат АцЛС очищен в 560 раз с выходом 9% и удельной активностью 358300 ед/мг белка. АцЛДК была очищена в 4828 раз с выходом 4.8%. Полученный препарат имел удельную активность 140 ед/мг белка. рН-оп-тимумы в фосфатном буфере АцЛС и АцЛДК 6.5 и 6.0 соответственно. Определены величины кажущихся К_m ферментов: К_m АцЛС 70 мМ для пирувата, К_m АцЛДК 20 мМ для АцЛ. АцЛС - аллосте-рический фермент с низким, сродством к субстрату, зависимость активности фермента от концентрации субстрата сигмоидная. Для АцЛДК характерна гиперболическая зависимость активности фермента от концентрации АцЛ и высокое сродство к субстрату (К_m= 20 мМ). Показано, что лейцин, валин и изолейцин являются активаторами для АцЛДК.