PCR-Invaderを用いたHCV NS5A領域Y93H変異検出法の開発

摘要

HCV治療において，経口 Direct Acting Antivi-rals (DAA) 2剤（プロテアーゼ阻害剤/NS5A阻害剤） を用いたIFN-freeの治療法が注目されている.しか し，治療不成功例ではそれぞれの作用部位に関与する 領域に耐性変異が出現する可能性があることや治療開 始前にこれらの耐性株がすでに存在していることが報 告されている.特に，NS5A領域のY93H(TAC—CAC) 変異は，genotype lb型の症例において，ダイレクトシー クエンス法（major peakのみの検討）で8.2%検出され ることが報告されている.しかし，ダイレクトシーク エンス法のminor peakで認められるような少量の耐性 ウィルスも治療効果に関係する可能性があり高感度の 測定系の確立が望まれている.今回，我々はY93H変 異を高感度に検出することを目的としてPCR-Invader を用いた定性解析法および相対定量解析法を開発した.