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ビタミンB_2およびB_6依存型酵素の立体構造と機能の精密解析

机译:维生素B_2和B_6依赖性酶的三维结构和功能的精确分析

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摘要

ビタミンB_2およびB6_依存型酵素は,生体内の代謝に重要な役割を担っており,多種多用なものが存在する.個々の酵素が,どのような分子を基質と認識し,どのような反応を触媒するのかは,活性部位の立体構造によって厳密に制御されている.しかしながら,現在のところ酵素そのものを直接目で見ることは不可能であり,アミノ酸配列やスペクトルから予測される立体構造はその全体構造のモチーフのみを示すもので,酵素の機能にかかわるアミノ酸倒錯間の相互作用を知ることはできない単結晶X線構造解析は,対象とする酵素の分子量によらず,立体構造を原子レベルで知る事ができ,活性部位に存在するアミノ酸残基と補酵素の相互作用様式を直接決定できる強力なツールである.生体内で微量にしか存在しない酵素をmgのオーダーで精製し,それを用いてX線回折実験に適した結晶を作成することは現在でも簡単ではないが,この数年の間に遺伝子操作技術の確立や放射光を用いた測定技術の進歩により,それまで考えられなかったようなスピードで解析が進むようになってきた.
机译:维生素B_2和B6_dependent酶在体内代谢中起重要作用,并且有许多不同的酶。每种酶识别什么样的分子作为底物,催化什么样的反应都受到活性位点三维结构的严格控制。但是,目前尚不能直接看到酶本身,并且从氨基酸序列和光谱预测的三维结构仅显示整个结构的基序,并且在与酶的功能有关的氨基酸变位之间。不了解相互作用的单晶X射线结构分析可以知道原子级的三维结构,而不管目标酶的分子量如何,以及存在于活性位点的氨基酸残基与辅酶之间的相互作用。它是可以直接确定样式的强大工具。纯化存在于生物体内的少量酶(毫克级)并将其用于制备适合于X射线衍射实验的晶体仍然不容易,但是近几年已经使用了基因操作技术。随着上述内容的建立以及使用辐射光的测量技术的进步,分析已经以前所未有的速度进行。

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