Deteccao do Grupo Mycoplasma mycoides por imunoperoxidase indireta (IPI) e PCR-REA em conduto auditivo de bovinos

摘要

O Grupo Mycoplasma mycoides (GMM) foi diagnosticado por PCR-REA e imunoperoxidase indireta (IPI) em amostras de lavados de conduto auditivo de bovinos no Estado do Rio de Janeiro, Brasil. 60 bovinos foram se-lecionados aleatoriamente. As lavagens foram feitas com uso de seringas estéreis contendo um volume de 60 ml_ de solucao salina tamponada (PBS pH 7.2). As amostras obtidas foram estocadas em glicerol (1:2) e congeladas a -20°C até uso. Estas amostras foram diluídas até 10~(-5) e repicadas emmeio Hayflick modificado, sólido e líquido, sendo incubados a 37°C por 48-72 horas. As placas foram mantidas em microaerofilia e observadas diariamente, para visualizacao das colónias típicas em "ovo-frito". Das 60 amostras cultivadas, 48 (80,00%)foram positivas para Mycoplasma spp. A prevalência obtida para o GMM na IPI foi de 20,0% (12/60) enquanto na PCR-REA foi de 41,7% (25/60). Das cepas tipificadas pela IPI 58,3% (7/12) foram M. mycoides subsp. mycoides LC e 41,7% (5/12) foram M. capricolum. Na PCR-REA o grupo M. mycoides confirmado pela visualizacao de um amplicon de 785bp, compatível com este grupo. O valor encontrado no teste Kappa para associacao entre estes testes foi de 0,14 (P>0,05. Na clivagem do produto da PCR com a enzima de restricao Alui, de cepas de referências e dos isolados de ouvido os fragmentos obtidos foram de 81, 98, 186 e 236pb, mas nao de 370pb, que é específica para o agente da Pleuropneumonia Contagiosa Bovina. A presenca de espécies de micoplasmas no condutoauditivo de bovinos assintomáticos representa um risco para propagacao de Mycoplasma spp. entre rebanhos bovinos no Brasil.