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【24h】质粒DNA与聚酰胺酰胺树状聚合物的相互作用:复合物形成的机理以及核酸酶敏感性和复合DNA转录活性诱导的变化分析

【摘要】与基于病毒的系统相比,将合成载体用于基因转移具有潜在的优势。但是,关于合成材料与DNA结合的机制以及这种相互作用所产生的DNA复合物的性质知之甚少。聚酰胺基胺(PAMAM)树状聚合物是具有定义的球形结构的独特聚合物。树状聚合物与DNA结合形成复合物,可在体外有效转染细胞。我们检查了DNA /树状聚合物复合物的形成,发现它完全基于电荷相互作用。配合物的电子显微镜检查表明,大多数质粒DNA收缩成分离的环面,但也显示出较大的,不规则的聚合物和DNA聚集体。质粒DNA与树状聚合物的结合似乎改变了二级和三级结构,但没有使DNA断裂或改变其一级结构。特定的核酸酶或含有核酸酶活性的细胞提取物可保护复合的DNA免受降解。虽然树状大分子复合DNA中启动子(对于T7聚合酶或真核RNA聚合酶II)的启动子体外转录的启动受到抑制,但RNA转录本的延伸和翻译似乎并未受到影响。当与天然存在的聚阳离子(如未乙酰化的组蛋白)复合时,这些类似于DNA功能的改变。但是,与树状大分子复合的DNA似乎可以维持转录活性,而相似电荷比的组蛋白复合物则不能。这些结果阐明了PAMAM树突状聚合物与DNA之间相互作用的某些方面,并可能导致聚合物设计的改进或DNA复合物的形成,这将提高非病毒基因转移的效率。

【作者】Anna U. Bielinska;Jolanta F. Kukowska-Latallo;James R. Baker Jr;

【作者单位】

【年(卷),期】1997(1353),2

【年度】1997

【页码】

【总页数】11

【原文格式】PDF

【正文语种】eng

【中图分类】Q6;

【关键词】转染;DNA;树枝状;

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