摘要:目的:从基因及蛋白水平探讨连翘根醇提物(ethanol extract of Forsythia suspensa root,FSEER)诱导人食管癌TE-13细胞凋亡的作用机制.方法:采用流式细胞(Flow cytometry,FCM)检测不同浓度FSEER (0.4,0.5,0.6 mg/ml)作用于TE-13细胞24h后,线粒体膜电位的变化;采用免疫印迹技术(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白(caspase-3、caspase-8、caspase-9和胞浆Cyt-c)在FSEER诱导TE-13细胞凋亡过程中的作用;通过RT-PCR方法检测0.4,0.5,0.6 mg/ml FSEER作用于TE-13细胞24h后,细胞凋亡相关基因Bax、Bad、Noxa、Bcl-2,Bcl-x(l),Mcl-1的表达变化.结果:TE-13细胞经0.4,0.5,0.6mg/ml FSEER作用24小时后,随FSEER作用浓度的增大,发生线粒体膜电位损伤的细胞数目逐渐增多,且明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);Westemblot分析结果显示,经FSEER处理后,TE-13细胞cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和胞浆Cyt-c表达水平逐渐增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),而caspase-8表达水平没有明显变化,与对照组相比差异没有统计学意义(P>0.05);RT-PCR检测结果显示,FSEER可以上调TE-13细胞Bax,Bad,Noxa表达,下调Bcl-2,Bcl-x(l),Mcl-1表达.结论:FSEER可能是通过依赖于线粒体的细胞凋亡内源途径而诱导人食管癌TE-13细胞发生凋亡.