摘要:本文报道的染色体加倍方法是一种基于单细胞的加倍技术,只需一步就可以获得倍性纯合的四倍体,避免了多细胞加倍法常常出现的嵌合体、混倍体等困难.以原生质体培养技术为基础,结合秋水仙素离体加倍处理,研发出一种高效诱导菊苣纯合四倍体的方法.从种子无菌苗叶片酶解和分离出原生质体,用0.1%~0.7%秋水仙素处理1~5小时,再经过几周的离体培养,高频率地分化出四倍体植株,加倍频率高达64%.研究结果表明,影响四倍体加倍率的关键因素是秋水仙素的使用浓度及处理时间,适宜的作用浓度范围为0.3%~0.5%、处理时间为2~3小时.将这些离体诱导的四倍体植株移栽到大田,并从自然条件下生长1月、2月和3个月的植株叶片取样,采用流细胞分析法鉴定其倍性,所有检测的植株100%为四倍体,不存在嵌合体或混倍体,表明这些四倍体的倍性是稳定的、纯合的.此外,该方法诱导的四倍体频率高,比原生质体融合加倍法高2倍多.这种单细胞加倍法对于植物的多倍体育种及种质资源创新具有一定的应用价值.