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中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会

召开年：2016
召开地：浙江宁波
出版时间： 2016-10-22

主办单位：中国畜牧兽医学会

会议文集：中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会论文集

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1.Wnt信号通路在牛胎盘发育过程中的功能
- 孙宏亮;许美花;王瑶;鲁文赓
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：牛滋养层细胞的正常分化与否和对子宫的浸润程度是囊胚早期植入和胎盘发育的关键。通过研究发现，Wnt通路或许可以提高滋养层细胞中磷脂的吸收和转运，而促进滋养层细胞的发育，并且在牛的滋养层细胞、母体胎盘和胎儿胎盘中都存在Wnt信号通路相关的蛋白出现和基因的表达，这说明Wnt信号通路在胎盘的形成和后续的发育过程中都扮演着重要的角色。而且，Wnt信号通路在牛囊胚的发育过程中也有重要作用，通过抑制GSK3激活Wnt信号通路，增加细胞内的β-catenin，能促进内细胞团、滋养层细胞的数量和多功能胚胎干细胞的生成，促进囊胚的发育。Wnt信号通路在牛滋养层细胞的分化、胎盘的早期建立和妊娠维持的过程中的作用还有很多是未知的。此外，胎盘和胚胎的发育也不止是受到Wnt信号通路单独的调控，hedghog、TGFβ/BMP、FGF等诸多传导信号都调节这一过程，或许还存在那些未知的通路，但是通过我们不懈的努力，解决这些问题。
2.核受体LXRα抗奶牛乳腺炎作用及其激动剂筛选
- 曹永国;付云贺;杨正涛;张乃生
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：奶牛乳腺炎是造成奶牛养殖业重大经济损失的主要疾病之一.能否有效控制乳腺组织剧烈的炎症反应,是决定奶牛临床型乳腺炎治疗最终转归的关键环节.传统中草药因药物残留较低,相对安全,在奶牛乳腺炎的防治中一直被寄予厚望.LXRα是核受体超家族的主要成员之一,与代谢、感染、免疫等众多病理生理过程都有密切关系,在乳业研究领域内由于LXRα被激活后不但能够提高乳脂率,还呈现出能够降低组织炎症反应的抗炎功能,可能是一种潜在的抗炎新靶点而备受关注.通过研究，本论文证实了LXRα可以作为乳腺炎抗炎治疗的潜在靶点，从15种中药单体中筛选出矢车菊素、甘草皂苷、柴胡皂苷、蒲公英甾等4种LXRa天然激动剂，确定了矢车菊素抗炎效果最强，并初步证实矢车菊素通过激活LXRa-ABCGl，抑制TLR4信号通路而发挥其抗炎作用。以上结果可为基于LXRa为靶点的乳腺炎抗炎药物研发提供初步的实验数据和参考。
3.HSP27基因在母牦牛生殖器官和孤雌激活胚胎中的表达
- 何翃闳;潘阳阳;李秦;陈平;温泽星;李谷月;蒋佳颖;余四九
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：通过克隆牦牛热休克蛋白27(heat shock proteins27,HSP27)基因,分析其生物学特性,探讨正常生理条件下HSP27基因在繁殖周期母牦牛主要生殖器官及不同时期牦牛孤雌激活胚胎中的表达差异,来阐明HSP27基因在牦牛中的生物学作用,为其生产应用提供理论依据.采取卵泡期后期、黄体期后期同侧的卵巢、输卵管和子宫,以及妊娠期早期(胚胎约长2.3cm)妊娠侧的卵巢、输卵管和子宫组织,以其cDNA为模板,利用RT-PCR扩增牦牛HSP27基因,并将纯化的PCR产物克隆到pMDTM 18-T Vector载体中进行测序;利用生物信息学软件对HSP27基因的特征进行生物信息学分析,预测功能结构域;采用实时荧光定量PCR检测HSP27基因在繁殖周期母牦牛主要生殖器官和不同时期牦牛孤雌激活胚胎中的相对表达量;采用western-blot法研究HSP27蛋白在繁殖周期母牦牛主要生殖器官中的表达量;采用免疫组织化学SP法和间接免疫荧光染色分别研究HSP27蛋白在繁殖周期母牦牛主要生殖器官和不同时期孤雌激活胚胎中的分布情况,用SPSS21.0软件对试验数据进行差异显著性分析.
4.Luman在小鼠精子中的表达定位
- 王磊;林鹏飞;杨迪琦;张瑞雪;陆敏杰;王爱华;靳亚平
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：Luman最早是被作为一种转录共调节因子而被发现的,属于一种核受体.通过实验发现Luman在小鼠精子的尾部表达,并且在睾丸以及附睾等不同部位处的精子上表达量不同.按形态学的划分，精子的结构主要分为头部、颈部和尾部，其中精子的颈部较短尾部较长，精子的尾部主要功能是维持精子的运动能力。精子的生成部位是睾丸中的曲细精管，之后进入附睾中进一步成熟，附睾尾中的精子成熟程度最高。精子在成熟过程中也伴随着形态的变化。睾丸曲细精管中的精子尾部刚刚形成，而附睾尾部的精子尾部发育完善。在授精过程中，精子靠尾部的摆动与卵子结合从而完成精卵结合。结合实验结果我们推测Luman有可能与精子的运动有关，进而会影响精子的授精能力，Luman是否正常表达可能关系到雄性动物的生殖能力。Luman在这一方面的功能将在以后的研究中进一步探索。
5.变性小鼠卵母细胞中姐妹染色单体分离与胞质分裂的不协调性
- 朱家桥;刘宗平
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：哺乳动物生殖细胞的分化取决于它所处的性腺微环境,而Y染色体上SRY基因的表达与否则决定了性腺向睾丸或卵巢的分化,所以精子和卵子的发生分别是由XY和XX性染色体决定的.当性腺反转时,生殖细胞类型与性染色体就不一致了.XX雄性(人和小鼠)和XY女性是不育的,但XY雌性小鼠则具有部分生育力,这取决于它的遗传背景和变性的原因.XO（单X染色体）雌性小鼠具有正常繁殖力，但是通过转基因的方式，使其表达Y染色体上的Zfy2基因时，它的卵母细胞则不能支持早期胚胎发育。总之，性染色体对于雌性动物繁殖力的影响是重要而复杂的。本研究试图通过B6.Y TIR变性小鼠来探索导致动物不育的机理以及性染色体在配子发生和胚胎发育中的作用。
6.醋酸棉酚对小鼠睾丸的毒性作用
- 梁璐;袁彦波;王海涛;赵树臣;侯振中;刘克祥
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：棉酚,又称棉籽醇,是一种黄色的酚类化合物,对人类和哺乳类动物有广泛的毒性作用.醋酸棉酚是棉酚最常用的药用形式.研究发现,棉酚具有抗炎、抗疟、抗病毒、抗生育及诱导肿瘤细胞凋亡的能力.本试验通过对雄性小鼠灌喂不同浓度的棉酚,观察小鼠睾丸组织结构和组织细胞凋亡图片,来检测棉酚对生精细胞凋亡的影响;利用PCR以及免疫组化技术测定小鼠睾丸组织Bax和Bcl-2基因和蛋白表达量,研究醋酸棉酚对雄性小鼠生殖系统的影响,为棉酚生殖毒性的研究提供实验基础.试验结果表明，醋酸棉酚能造成小鼠睾丸生精细胞结构异常，引起小鼠生殖系统不同程度的损伤，导致小鼠睾丸生精细胞发生凋亡，生精细胞凋亡与Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达存在着一定的关系，即Bcl-2与Bax参与了小鼠生精细胞的凋亡调控，并且表达与所服棉酚剂量有关，棉酚造成雄性小鼠生殖能力下降可能是由于生精细胞凋亡所引起的，虽然棉酚诱导生精细胞凋亡是由多种基因参与调控的过程，其中Bcl-2基因和Bax基因起到重要的作用。
7.棉酚对小鼠的生殖毒性作用
- 王海涛;梁璐;赵树臣;侯振中
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：棉酚(GOS)是一种黄色多元酚类有毒化合物.棉酚的毒性主要由活性醛基和活性羟基引起.动物摄入棉酚后,通过全身血液循环到达生殖器官,引起生殖毒性.本试验主要研究不同浓度棉酚对小睾丸组织抗氧化酶活性的影响,及对相关凋亡蛋白NF-κB(p65)、p53、caspase-3表达的影响,旨在进一步了解棉酚的生殖毒性作用机制.本试验中MDA增加说明ROS产生增多，产生了生殖毒性，同时抗氧化酶活性减弱说明造成了氧化应激，通过氧化应激引起NF-κB(p65)，p53和caspase-3的变化，引起睾丸细胞死亡。表明睾丸细胞凋亡与氧化应激和NF-κB(p65)，p53和caspase-3蛋白表达存在一定关系，并且表达与棉酚的剂量有关，棉酚造成雄性小鼠生殖能力下降可能是由于睾丸细胞凋亡所引起的，由多种基因参与调控，其中NF-κB(p65)，p53和caspase-3基因起到重要的作用。
8.组蛋白乙酰化激活剂CTB和抑制剂Ⅱ对小鼠裸卵体外成熟的影响
- 牛梦涵;章孝荣;曹鸿国
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：以模式动物小鼠裸卵(Denuded oocyte,DOs)为研究对象,小鼠裸卵为无卵丘细胞包裹的卵母细胞,探讨组蛋白乙酰化调控对小鼠卵母细胞体外成熟的影响.实验采用生发泡期(Germinal vesicle,GV)小鼠裸卵为实验材料,在裸卵体外成熟培养过程中,通过分别添加组蛋白乙酰化激活剂CTB和组蛋白乙酰化抑制剂Ⅱ调控卵母细胞组蛋白乙酰化水平,实验共分为三组:对照组采用添加基础成熟液进行体外成熟培养,基础成熟液主要成分为TCM 199+1％谷氨酰胺+1％丙酮酸钠+1％非必须氨基酸+15％ FBS,实验组分别在基础成熟液中添加组蛋白乙酰化激活剂CTB和组蛋白乙酰化抑制剂Ⅱ,体外成熟培养24h,对成熟裸卵进行免疫荧光染色,记录实验数据并进行统计分析.
9.PIK1在猪卵母细胞减数分裂过程中的表达与作用的研究
- 廖丫丫;崔盼盼;陈长超;张子霄;姚凌云;张越;芮荣;剧世强
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：PIK1(Polo-like kinase l)是一种广泛存在于真核生物中的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶.其结构和功能都十分保守.研究表明,PIK1在肿瘤细胞有丝分裂过程中扮演着重要角色,而在猪卵母细胞减数分裂中的研究较少.本研究旨在研究PIK1在猪卵母细胞减数分裂过程中的动态表达及其定位.本研究结果表明PIK1激酶在猪卵母细胞减数分裂过程中确有表达，且其亚细胞定位与α-tubulin分布密切相关，PIK1对于卵母细胞减数分裂的顺利进行及第一极体排出具有重要的调节作用。
10.Aurora A在猪早期胚胎发育过程中的表达与功能研究
- 崔盼盼;廖丫丫;陈长超;张子霄;姚凌云;张越;芮荣;剧世强
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：极光激酶A(AuroraAkinase)是一种参与调控有丝分裂启动、中心体复制与分离、纺锤体组装与胞质分裂等生物学事件的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,大量研究表明AuroraA在肿瘤形成及抗癌药物等方面发挥至关重要的作用,而在哺乳动物生殖细胞领域的功能目前尚未十分清楚.本研究旨在探讨AuroraA在猪(Sus scrofa)早期胚胎有丝分裂过程中的动态表达及其相关功能.本研究表明，猪早期胚胎发育过程中，Aurora A的动态表达及亚细胞定位与α-tubulin的分布密切相关，且呈现明显的阶段性分布特点；此外，AuroraA参与调控猪早期胚胎的有丝分裂，为AuroraA在该过程中的相关信号通路提供了重要的实验基础。
11.牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及其临床治疗分析
- 虎啸;张宁;王亚丹;朱邯豫;赵玉玺;王新庄
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：牛的子宫内膜炎是危害牛业生产发展的主要产科疾病,大部分由牛产后细菌感染引起子宫内膜的粘液性或脓性局部炎症反应,如果不及时治疗,炎症继续扩散,引起卵巢炎、输卵管炎、腹膜炎等,会导致母牛发情或妊娠推迟,繁殖力降低,产犊间隔时间延长,产奶量减少,严重的影响牛的健康和繁殖性能.本研究通过对河南省内某牛场的子宫内膜炎患牛和健康牛的子宫内容物进行细菌分离鉴定、药敏试验、致病性试验和临床治疗分析,为本地区子宫内膜炎的治疗提供参考的依据.
12.PPARγ对猪血管内皮细胞增殖、迁移及小管形成的影响
- 彭璇;薛立群;张居作;袁安文
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：研究设置PPARγ激动组(罗格列酮)、抑制组(T0070907)及对照组,采用iCelligence细胞功能分析、划痕实验及Matrigel三维培养对猪血管内皮细胞增殖、迁移及小管形成进行了测定,所有实验重复三次.结果发现:罗格列酮在低浓度(5、10tM)下促进猪血管内皮细胞的增殖,15μM药物干预效果不明显,20μM的罗格列酮抑制细胞增殖.不同浓度的T0070907对细胞产生抑制作用,实验组细胞指数均低于对照组,且在5μM至15μM的浓度区间中呈浓度负相关性,20μM时细胞停止增殖.罗格列酮和T0070907能在相应浓度分别促进和抑制猪血管内皮细胞的增殖、迁移及小管形成，表明PPARγ与细胞生物学行为相关，一定程度上证实PPARγ对猪血管生成的促进作用。
13.生殖激素调控发情周期中牦牛输卵管特异性糖蛋白分泌的研究
- 温泽星;彭秀梅;张译夫;杨融;潘阳阳;余四九
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：牦牛(Bos grunniens)繁殖效率较低，一般两年一胎或三年两胎，此外，牦牛也是用于研究生活在高寒低氧环境的典型高原哺乳动物之一。因此，应用辅助繁殖技术来提高牦牛繁殖效率具有一定意义。如何科学地辅助繁殖呢？了解雌性牦牛在排卵期、受精和胚胎早期发育过程中输卵管内发生的变化是首先要解决的问题。本课题组通过在牦牛体内与体外的一系列相关研究，初步探讨了FSH、LH、E2和P4对发情周期中牦牛Ovn分泌的影响。研究发现：Ovn在牦牛发情周期输卵管中的表达。牦牛输卵管上皮细胞的分离培养及生殖激素对Qvn表达的影响。总之，Ovn在牦牛发情周期输卵管中的表达具有差异；体外培养体系中分别添加FSH、LH、E2和P4，均可影响Ovn的表达。
14.Gαs在绵羊耳部不同毛色皮肤中的表达与定位
- 秦红;王准;李振;庞全海
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：本试验通过设计引物扩增绵羊Gas目的基因序列，从基因水平和蛋白水平进行定量分析，并对其在不同毛色皮肤组织中进行定位分析，以研究其表达的差异，从而为进一步研究该基因调控绵羊毛色的形成机制提供基本的理论依据。试验结果表明：Gas在绵羊耳部黑色皮肤和白色皮肤中均有表达且存在差异性，初步判断Gas参与绵羊耳部毛色的调控过程。
15.猪生长激素自分泌作用机制研究
- 齐传翔;杨开典;高尚;杨跃飞;鞠辉明
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：生长激素(growth hormone,GH)是由脑垂体前叶分泌的一种促进机体合成代谢和蛋白质合成的多肽激素.随着对GH内分泌效应研究的深入,研究结果显示出GH不仅在生长轴内分泌调控机制中发挥着主导作用,还可能通过自分泌(autocrine)作用于产生细胞因子的细胞本身,调节细胞因子活性,在局部发挥效应.本研究构建了pGH过表达载体,并设计了2条用于pGH基因沉默的siRNA,转染细胞后观察对细胞及线粒体相关功能的影响.western blot检测结果表明,和正常细胞组相比,GH siRNA转染细胞组和GH过表达细胞组中GH表达水平分别下降约53％和增加63％,各组间差异及显著(P＜0.01).利用细胞流式术对细胞周期进行检测发现,GH过表达及表达下降后对细胞周期及凋亡均有显著影响,各组间差异及显著(P＜0.01).GH表达变化在对线粒体形态学及功能均有重要影响.GH过表达后,电镜检测发现细胞内线粒体数量显著增加,细胞活性氧ROS及膜电位均有明显增加,组间差异显著(p＜0.05).初步研究结果表明,猪pGH对细胞生长周期、凋亡及线粒体功能均有有显著影响.本研究为日后研究pGH在细胞自分泌作用机制中的影响奠定基础.
16.可控表达MSTN shRNA转基因小鼠的制备及其对发育的影响
- 祁钰钰;杨跃飞;杨开典;齐传翔;鞠辉明
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：MSTN是肌肉生长发育的一个重要的负调控因子,已有研究发现MSTN基因持续低表达或者敲除后在提高肌肉量的同时也和难产率、流产率及胎儿死亡率高有很高的关联性.本研究中,设计了一对小鼠MSTN shRNA,验证其效率后,构建了整合型四环素诱导表达载体pSingle-tTS-MSTNshRNA,细胞水平验证其诱导活性剂表达活性后,利用显微注射法制备一批转基因小鼠.分子生物学检测结果表明，和正常小鼠组及未经诱导组相比，转基因小鼠MSTNshRNA诱导表达后，P21表达显著上调(1±0.06&0.85±0.09&0.57±0.25)，CDK2表达显著降低(1±0.24&0.73±0.19&1.3 7±0.37)，同时下调成肌分化因子MyoD的表达(1±0.14&0.73±0.23&1.37±0.24)，说明转基因小鼠骨骼肌细胞的增殖和分化受到明显的调控。本研究说明了成功制备了MSTN shRNA可控表达转基因小鼠，证明了MSTN表达在出生后调控可以实现肌肉量增加的同时不会对转基因小鼠自身有不良影响。为将可控表达的MSTN基因应用到基因工程育种、药物治疗肌肉萎缩病等方面奠定技术基础。
17.不同佐剂对GnRH疫苗主动免疫去势影响综述
- 纪世春;田伟国;朱根宝;单鑫;董森;黄伟平;刘亚
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：促性腺激素释放激素(GnRH),由下丘脑产生并贮存于该腺体内,当机体受到一定的刺激时进入血液,经垂体门脉系统作用于腺垂体,促进垂体分泌和释放促黄体素(LH)和促卵泡素(FSH),通过下丘脑-垂体-性腺轴,影响生殖内分泌和生殖细胞的发育.GnRH的这一功能使其可以作为免疫原免疫动物从而达到抑制动物生殖的目的.研究表明：免疫佐剂的使用可减少免疫原用量提高免疫效果，同时还会给动物机体带来一定的副作用。不同的佐剂引起的炎症反应是不同的，而这些炎症反应也使得国际的动物监管机构禁止或限制某些佐剂的使用（特别是弗氏佐剂）。因此，使用可降低炎症反应的佐剂显得十分重要。此外，减少佐剂的使用、改变给药方式（如皮下注射代替肌肉注射）或使用可替代的佐剂等都可降低动物注射部位的炎症反应。
18.DEX对体外培养PMN的雌激素受体介导的炎症通路的影响
- 刘阳;丁宁;杜立银
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：围产期作为母牛启动分娩、分娩、泌乳和产后恢复等一系列生理现象发生的特殊阶段,其剧烈的生理应激会诱发机体出现围产期免疫抑制.牛围产期免疫抑制与疾病的高发密切相关,其中,类固醇激素是重要诱因,中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil leukocyte,PMN)机能障碍是关键因素.作为应激反应和启动分娩的关键激素之一的糖皮质激素(Glucocorticoid,GC)水平与外周血中中性粒细胞的功能状态密切相关.GC可以造成外周血PMN的数量增加、功能降低,诱发分娩期PMN功能障碍性疾病,减少血中γδT细胞数、降低乳汁IgM水平并抑制细胞因子产生结果导致血中未成熟PMN大量增加,成熟PMN数减少.这是由于GC通过核受体(Nuclear receptor)和/或膜受体(Membrane receptor)途径发挥"基因组效应"与"非基因组效应",并通过信号因子与Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)信号传导途径交互联系来调控PMN活性关键因子的表达和释放.不同浓度DEX在不同时间点可以调节雌激素受体的表达，同时对TLR-NF-KB通路起到调控作用，这些结果表明DEX可以调节围产期蒙古奶牛PMN免疫功能，继而对临床免疫性疾病起到预防和治疗的目的。
19.玉米赤霉烯酮胶体金免疫层析试纸的建立
- 孙亚宁;张勇
- 《中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会》 | 2016年
摘要：玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是镰刀菌属污染玉米等谷类后产生的一种类雌激素样真菌毒素,主要危害动物的生殖系统.动物长期食用被ZEN污染的饲料可能导致高雌激素综合症,其主要的表现为雌性动物乳房发育异常、卵巢萎缩、发情期间隔变长、外阴阴道炎、连续动情期、黄体持久、生殖力减弱、哺乳推迟、假孕、流产、初生胎儿异常、畸形和死胎等生殖系统异常现象,给养殖业带来严重的危害.因此,ZEN的快速检测在畜禽饲料安全及生殖疾病防控方面具有重要意义.本研究制备的ZEN胶体金免疫层析试纸条具有很好的灵敏度、特异性、亲和力，准确性及稳定性，可以用于饲料（原料）ZEN污染物的检测，对于养殖场预防动物由|卜食用被ZEN污染的饲料而致生殖系统疾病具有指导意义。