摘要：本文以葡萄栽培品种“红地球”为试材，选取六周非木质化的茎梢，切成含腋芽的茎段，无菌处理后，外植体接种在MS(Murashige and Skoog 1962)附加3%蔗搪以及BAP(O.5mg/L,)和IBA(0.2mg/L)培养基上，建立试管苗无性繁殖系。采用CTAB法提取植物总DNA，PCR扩增的引物分别为DREB1 b-F,5'-GTACTCTAGTCAATTGAGACTC-3'；DREBIb-R, 5'-GAAACGACTATCGAATATTAG-3'；PCR反应体系：3.5μ110ng模板DNA，其余混合液16.5μl含1.5 mM MgCl2,1U Taq polymerase，200μM dMP,1 x Taq polymerase buffer，1pM的the primers。扩增程序：94℃4min；94℃30s, 55℃1min,72℃1min,35循环；72℃6min。扩增产物1 x TAE中含1.5%(w/v)琼脂糖电泳,EB(ethidium bromide)染色，紫外灯下观察照相。试验结果发现，PCR阳性株系均有阳性信号，对照无杂交信号，进一步证实外源目的基因DREBIb在RNA水平上发生了转录。并评价了转基因葡萄的抗寒性。
