摘要：研制了以聚碳酸酯(PC)为基底,以表面修饰了人免疫缺陷病毒(HIV)核心抗原p24单克隆一级抗体(Rp24I)的纳米金组合电极(Rp24I/GNEE)为工作电极的微流动注射安培检测PC芯片,并应用于p24实时分析。检测原理是基于夹心免疫分析法,在电压驱动和流动条件下,一次性加入p24样品和纳米金胶标记的p24二级抗体(Rp24 Ⅱ-Au,金胶直径为50～100 nm)溶液,利用不同物质因受电场影响而在微管道中的迁移速率(Mobility)不同,使得p24抗原和Rp24 Ⅱ-Au依次到达GNEE电极,与其表面的Rp24 Ⅰ生成三明治型免疫复合物(Rp24 Ⅰ/p24/Rp24 Ⅱ-Au)。接着以方波溶出伏安法(SWSV)将复合物上的金胶粒子溶出,由于溶出电流大小与被测定p24呈正比关系,从而获得p24的测定校正曲线。在pH 6.2的磷酸缓冲液(PBS)中p24检测时间小于2min,线性范围为1～500 ng/L (R2=0.9975),检测限为0.25 ng/L。由于采用GNEE作为工作电极,大大增加了电极表面积,电流响应较未经纳米修饰前提高150多倍；灵敏度达1μA·ng-1·mL,明显高于传统酶联免疫吸附试验(ELISA)方法；微流控芯片在15 m2的PC中集成了加样、分离和检测系统,小巧便携、免疫反应和检测过程只需加样一步完成,简化了分析步骤,缩短了检测时间。该传感芯片对实现艾滋病的及早诊断和大范围筛查具有相当应用价值。
