PARTIAL CHARACTERIZATION OF Mycobacterium tuberculosis DosR REGULATED GENES: Rv2626c, Rv2625 AND Rv2624c

摘要

The Rv2626c, Rv2625c and Rv2624c genes of the human pathogen M. tuberculosis belong to the persistence or dosR regulon and their expression is increased significantly under different persistence-related conditions. In this work the transcription of the Rv2626c-Rv2624c region was analyzed using conventional RT-PCR and promoter fusions to gfp. The data suggest that these genes are arranged in an operon that is transcribed from a promoter located in the 178bp upstream of the Rv2626c gene. Using the BACTH system it was found that both Rv2626 and Rv2625 proteins interact with themselves to form homodimers. Additionally, a Rv2625c knock out M. tuberculosis strain was constructed, which also showed a significant decrease in Rv2624c expression. Contrary to expectations, in vitro growth of the mutant strain was similar to that of wild type strain during vegetative growth, oxidative stress and treatment with low doses of nitric oxide, indicating that these genes are not involved in the protective responses to the tested stress conditions.%Los genes Rv2626c, Rv2625c y Rv2624c del patógeno humano Mycobacterium tuberculosis pertenecen al regulón de persistencia o dosR, y su expresión se incrementa de manera significativa en diferentes condiciones asociadas a persistencia. En este trabajo se realizó el análisis transcripcional de la región Rv2626c-Rv2624c por RT-PCR convencional y fusiones al gen gfp. Los datos sugieren que estos genes están organizados en un operón que se transcribe a partir de un promotor localizado en las 178pb que preceden a la secuencia codificante del gen Rv2626c. Usando el sistema BACTH se observó que las proteínas Rv2626 y Rv2625 interaccionan con ellas mismas formando homodímeros. Adicionalmente, se construyó una cepa mutante de M. tuberculosis que carece del gen Rv2625c, la cual también mostró una disminución significativa en la expresión de Rv2624c. Contrariamente a lo esperado, el crecimiento in vitro de las cepas mutante y silvestre fue igual durante el crecimiento vegetativo, estrés oxidativo y tratamiento con dosis bajas de óxido nítrico, lo que indica que estos genes no esíán involucrados en la respuesta protectora a las condiciones de estrés ensayadas.