黄芪多糖对大鼠T淋巴细胞顺铂处理后自噬的影响

摘要

目的 研究黄芪多糖对大鼠脾脏T细胞化疗后自噬的影响.方法 取6～8周龄SD大鼠,分离脾脏T淋巴细胞,处理12h和24h,收集细胞提取总RNA和蛋白,采用荧光定量PCR检测mTOR、ClassI PI3K、ClassIII PI3K、Atg5、Beclin1的mRNA表达量,Western Bot检测mTOR、ClassI PI3K、ClassIII PI3K、Atg5、Beclin1、LC3和Caspase-3的蛋白表达变化,流式细胞术双染Annexin V-FITC和Propidium Iodide(PI)检测细胞凋亡变化.结果 分离得到CD3+T淋巴细胞占总细胞比例为67.9％,其中CD3+CD4+T淋巴细胞比例为27.9％,CD3+CD8+T淋巴细胞比例为64.2％,大鼠脾脏T淋巴细胞在顺铂处理12h,24h后自噬相关基因mTOR、ClassI PI3K、ClassIII PI3K、Atg5、Beclin1的mRNA上升,mTOR、ClassI PI3K、ClassIII PI3K蛋白表达下降,同时Atg5、Beclin1、LC3和Caspase-3的蛋白表达上升,而黄芪多糖能够抑制顺铂处理后自噬相关基因mRNA的表达,抑制Atg5、Beclin1、LC3和Caspase-3的表达,同时mTOR、ClassI PI3K、ClassIII PI3K蛋白表达上升,流式细胞检测发现黄芪多糖能够抑制顺铂导致的T淋巴细胞凋亡.结论 黄芪多糖能够抑制脾脏T淋巴细胞顺铂处理后自噬相关基因mRNA和蛋白的表达,抑制T细胞自噬引起的细胞凋亡.