基于荧光定量PCR的兔毛定性检测方法

摘要

建立一种特异、灵敏的兔毛定性检测方法,并对方法进行评价,为准确有效检测兔毛方法的建立提供依据.文章针对兔线粒体COX Ⅰ基因序列进行引物探针设计,经Blast软件对相似序列搜索后,筛选出一套最优与常见禽畜无交叉反应的引物;采用常见动物纤维鸭绒、鹅绒、绵羊毛、山羊绒、牦牛绒、羊驼毛DNA进行特异性实验;对提取的兔毛DNA梯度稀释后分别进行荧光PCR扩增,确定检测方法的灵敏度;对引物进行3次重复性试验,验证其重复性.结果表明:设计的针对兔线粒体COX Ⅰ基因的引物及探针仅对兔毛有扩增,而对其他对照及阴性对照均无扩增.该荧光PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可以快速准确地定性检测纤维制品中的兔毛成分.