RITA通过ROS/Src/Stat3通路诱导肺鳞癌H226细胞凋亡

摘要

目的 探究肿瘤凋亡和P53再生化合物(RITA)对肺鳞癌细胞凋亡的影响及作用机制.方法 采用MTT细胞活力检测法检测不同浓度RITA对肺鳞癌细胞H226和正常肺上皮细胞BEAS-2B增殖的影响,筛选合适的干预浓度.经0、0.05、0.1和0.2μmol/L RITA处理后,采用流式细胞术分析H226细胞内活性氧(ROS)产生和细胞凋亡水平变化.Western blot检测P-Src、Src、转录信号转换器和激活因子3(Stat3)、P-Stat3、Bim、Mcl-1、存活蛋白(Survivin)、Bax及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的蛋白表达水平.H226细胞经0.2μmol/L RITA和5.0 mmol/L抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)同时处理后,观察NAC能否逆转RITA对H226细胞的生物学效应.结果 0.05～0.2μmol/L范围内,随着RITA浓度的升高,H226细胞增殖活性下降,半抑制浓度(IC50)为(0.130±0.008)μmol/L,而相同给药浓度下对BEAS-2B细胞增殖无明显影响.0～0.2μmol/L RITA可增加H226细胞内ROS水平并诱导细胞凋亡,下调P-Src、P-Stat3、Mcl-1、Survivin、Bcl-2蛋白表达,上调Bim、Bax蛋白表达.经NAC处理后,RITA抑制Src/Stat3通路活性及诱导H226细胞凋亡的效应被逆转.结论 RITA通过提高肺鳞癌H226细胞内ROS的水平,从而抑制Src/Stat3通路活性,最终诱导细胞凋亡.