骨保护素参与高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞钙化调节的机制初探

摘要

cqvip:目的以β-磷酸甘油诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化模型为研究对象,初步探讨骨保护素(OPG)干预对VSMC钙化的影响及机制。方法体外分离培养大鼠主动脉VSMC。PBS为对照组,以10 mmol/Lβ-磷酸甘油诱导钙化10 d为钙化对照组,β-磷酸甘油诱导钙化同时予以剂量梯度(1、4、8μg/L)的OPG干预为OPG干预组。茜素红染色检测各组钙化结节形成情况。邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙沉积含量。比色法测定碱性磷酸酶(ALP)活性。免疫蛋白印迹(Western blot)检测各组Notch1/RBP-JK通路蛋白的表达。结果茜素红染色显示,与钙化对照组比较,OPG干预组大鼠VSMC钙化结节明显减少,OPG干预组的钙含量、ALP活性均明显下降(均P<0.05),且有剂量依赖性。Westernblot结果显示,与钙化对照组比较,OPG干预组的Notch1、RBP-JK、Jagged1、Msx2蛋白表达水平明显下降(均P<0.05)。结论OPG可能通过下调Notch1/RBP-JK通路蛋白表达,参与大鼠VSMC钙化过程调节。