LC-MS/MS法分析人血浆中西格列汀浓度及其应用研究

摘要

目的 建立一种测定人血浆中西格列汀浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法,并将该方法应用于西格列汀在人体内的药代动力学研究.方法 以西格列汀-d4为内标,血浆样品经CleanertPPT沉淀板沉淀后,通过Diamonsil C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,使用甲醇-10 mmol/L甲酸铵水溶液(含10％甲醇,0.1％甲酸)作为流动相,进行梯度洗脱,流速为0.5 mL/min.通过电喷雾电离源(ESI),以多反应监测(MRM)模式进行正离子检测.从选择性、残留、线性范围与定量下限、精密度与准确度、基质效应和回收率、稳定性方面进行方法学验证.同时考察健康人口服西格列汀片100 mg后的主要药代动力学参数.结果 西格列汀、西格列汀-d4的MRM离子对分别为m/z 408.0→235.2、m/z 412.1→239.0.人血浆中西格列汀在0.5～1000μg/L浓度范围内线性关系良好(R2>0.99),定量下限为0.5μg/L;定量下限和质控样品的批内、批间精密度(RSD)在0.83％～12.80％之间,准确度(RE)在±10.0％以内.健康人口服西格列汀片100 mg后主要药代动力学参数:达峰时间(Tmax)、达峰浓度(Cmax)、、生物利用度(AUC)、半衰期(T1/2)分别为(2.44±1.29)h、(375±138)μg/L、(2915±585)h·μg/L、(11.10±2.41)h.结论 本LC-MS/MS分析方法敏感度高且样品处理方法简单快速,满足生物分析的法规要求,可应用于人体内西格列汀的药代动力学研究.