人PBMC中免疫蛋白酶体亚基LMP7酶活力的检测

摘要

目的该研究旨在建立一种利用荧光多肽底物,检测人PBMC中免疫蛋白酶体亚基LMP7酶活力的方法,为进一步研究LMP7活性与类风湿性关节炎(RA)发生发展的关系提供检测依据。方法采集2018年8—12月入院的7例类风湿关节炎患者及2名健康受试者外周静脉血,提取PBMC,通过单因素试验研究LMP7酶活力检测条件:PBMC细胞浓度、细胞裂解冻融循环次数、细胞冻存时间对其影响。结果PBMC细胞浓度、冻融循环次数、冻存时间等实验因素都对LMP7酶活性测定结果均产生影响。酶活力测定的最优化条件:PBMC细胞浓度500个/μL,进行一次冻融裂解细胞,液氮冻存细胞并尽快进行酶活力检测。结论建立了一种简便、实用、可靠的人PBMC中LMP7酶活力检测方法。