BA-ELISA定量检测人血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa、CD62p的表达及其临床应用

摘要

目的建立测定血小板膜糖蛋白功能的生物素一亲和素-酶联免疫吸附（BA-ELISA）方法，并探讨其临床应用价值。方法采用抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa（membraneglycoproteinⅡb／Ⅲa，GPⅡb／Ⅲa）单抗7E3和抗血小板CD62p单抗SZ51及生物素一亲和素系统建立BA-ELISA方法，并应用该方法检测50名健康志愿者、30名急性心肌梗死（AMI）、30名急性脑梗死（ACI）和30名糖尿病（DM）患者的血小板膜糖蛋白功能，并与流式细胞术（FCM）测定结果进行比较。同时，应用该方法对抑制性单抗SZ21和阿司匹林抑制血小板活化的功能效果进行测定。结果该方法检测血小板计数敏感度低达3．13×109／L（7E3包被板）和6．25×109／L（SZ51包被板），批内和批间变异系数分别为6．23％～8．35％和4．38％-5．78％。测得AMI、ACI和DM患者ADP诱导的（未诱导的）血小板的GPⅡb／ⅢaCD62p表达量均显著高于健康志愿者（P〈0．01）。BA-ELISA测定表明，SZ21和阿司匹林可明显抑制ADP诱导的血小板功能。该方法和FCM同时测定健康志愿者、AMI、ACI和DM患者的GPⅡb／Ⅲa和CD62p表达水平。测定数据经直线回归分析得r=0．86。结论BA-ELISA检测血小板的膜糖蛋白，可精确判断血小板的功能状态，为指导临床预防、诊治、评估疾病提供简便、可行的方法。活化的血小板膜糖蛋白测定可从凝血的角度对上述疾病的早期诊断、病情进展的判断、抗血栓药物的评估以及判断疾病的预后起到辅助作用。