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红肉蜜柚汁胞蛋白质双向电泳体系优化研究

     

摘要

为建立适合红肉蜜柚发育过程中汁胞蛋白质组学的研究体系,以着色初始时期的红肉蜜柚汁胞为试材,摸索最适合的蛋白质双向电泳体系参数。结果表明,酚提取法比 TCA-丙酮法更适合于红肉蜜柚汁胞总蛋白质的提取,提取得率高,双向电泳图谱清晰。采取18 cm、线性pH 3~10和18 cm、线性pH 4~7相结合的分析策略,可获得更为完整的蛋白质组信息,其第一向等电聚焦最佳参数(总伏小时数)分别为30000 Vhs和43000 Vhs。%In order to establish proteomics research system for analyzing‘Hongroumiyou’ juice sacs proteins, using‘Hongroumiyou’ juice sacs in initial color change stage as test material, exploring the most suitable 2-DE system parameters. The results indicated that compared with TCA-acetone extraction method, phenol extraction method was more appropriate for ‘Hongroumiyou’ juice sacs total protein yield. Using 18 cm, pH 4~7 linner immobiline combined with 18 cm, pH 3~10 linner immobiline could had clear and high resolution 2-DE patterns. Both of the best isoelectric focused parameter was 43 000 vhs and 30 000 vhs, respectively.

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